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ＲＮＡ分解システムＰ－ｂｏｄｙによるＰＫＣシグナル制御メカニズムの解明

RNA降解系统P-body阐明PKC信号控制机制

基本信息

批准号：
12J10593
负责人：
土井章
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Kinki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J10593/
关键词：
PKC MAPK 細胞内シグナル伝達 RNA分解システム P-body

项目摘要

PKC/MAPKシグナルは細胞の増殖のみならず、がん化の病態にも深く関与しているため、MAPKの活性化と抑制のメカニズムを分子レベルで知ることはがん化のメカニズムを明らかにし、これらの経路を標的とした新規分子標的薬を創製する上でも極めて重要である。本研究は、分裂酵母をモデル生物として、“PKC活性依存的な細胞増殖抑制という表現型を指標にした分子遺伝学的アプローチ”により、PKCシグナル伝達経路の新規抑制遺伝子として同定したRNA分解システムP-body局在因子が、どのようなメカニズムでPKCシグナルの抑制に関わるのかを、遺伝学、生化学、細胞生物学的手法を用いて明らかにすることを目指す。本年度は以下のことを明らかにした。Pck2の活性化機構と、P-body局在移行の関係性を明らかにする目的で、昨年に引き続きPKCの活性化因子として知られているリン酸化酵素PDK1の分裂酵母ホモログであるKsg1に焦点を当て研究を行った。具体的にはRIを用い初年度に作成した各種ドメイン構造を欠損させた変異体、活性部位に変異を導入した変異体、Ksg1によるリン酸化を受ける部位に変異を導入した変異体についてPck2のリン酸化酵素活性を測定したが、優位な変化を測定することができなかった。現在までにPck2阻害薬およびksg1 mutantではPck2のP-body移行率が変化していることから測定方法を改めることで変化を捉えられるのではないかと考えている。今回の研究を行う過程で、PKCと同じくカルシウムイオンにより機能が制御されているカルシュニューリンが、PKCと同様にストレスを感知し、RNA granuleに移行することでシグナル伝達機構を制御していることを明らかとできた。また、RNA granuleに局在し抗がん薬の主要なターゲットであるTORが関与するシグナル伝達経路を網羅的に明らかにできた。

PKC/MAPK activation and inhibition of PKC/MAPK in cell proliferation are closely related to the pathogenesis of PKC/MAPK, and molecular mechanisms for PKC/MAPK activation and inhibition of PKC/MAPK in cell proliferation are important for the development of PKC/MAPK pathway and molecular mechanisms for PKC/MAPK pathway. The present study is aimed at studying the biological and phenotypic characteristics of PKC activity-dependent cell growth inhibition and molecular genetic factors associated with PKC activity-dependent cell growth inhibition. The method of cell biology is used in the field of biology. This year, the following is a list of activities. Pck2 activation mechanism, P-body structure in the migration of the relationship between the purpose, last year to introduce PKC activation factor, to understand the enzyme PDK1 cleavage yeast, Ksg1 focus on the study The specific RI was prepared in the early years of use, and various kinds of enzyme structures were introduced, active sites were introduced, Ksg1 was introduced, and the enzyme activity of Pck2 was determined. Pck2 resistance is now a variant of Pck2's P-body migration rate. In this paper, we study the process of PKC and PKC, the function of PKC and PKC, the RNA granule migration, and the mechanism of PKC and PKC. The RNA granule is a key component of the RNA pathway.