Untersuchungen zur Beteiligung von Polymerase (NIb) und Helikase (CI) des Plum pox virus der Pflaume (PPV) an der RNA-Rekombination

李痘病毒(PPV)聚合酶(NIb)和解旋酶(CI)参与RNA重组的研究

基本信息

  • 批准号:
    5413502
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    德国
  • 项目类别:
    Research Grants
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    德国
  • 起止时间:
    2002-12-31 至 2007-12-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Für eine Replikation und Rekombination von pflanzenviraler RNA ist die Interaktion zwischen viraler RNA und RNA-abhängigenRNA-Polymerasen (RdRp) und Helikasen essentiell. Die Familie der Potyviridae ist in Bezug auf Rekombination kaum, beziehungsweise bezüglich des Rekombinationsmechanismus bisher nicht untersucht. Ziel des Projektes ist, Proteine des Plum pox virus (PPV), die an der Rekombination beteiligt sind, zu identifizieren und rekombinationsaktive Bereiche zu lokalisieren. Kürzlich konnte die Rekombination verschiedener PPV Hüllproteindefektmutanten in PPV Hüllprotein (CP) transgenen Nicotiana benthamiana Pflanzen nachgewiesen werden. Dieses System aus transgener Pflanze und viralem `full-lengthA Klon ermöglicht die Herstellung unterschiedlicher Virusmutanten und ihr Screening auf eine Beeinträchtigung der Rekombinationsfähigkeit. An der Rekombination von Potyviren sind wahrscheinlich die RNA-abhängige-RNA-Polymerase/Replikase (NIb) und die Helikase (CI) beteiligt. Das NIb- und das CI-Gen sollen zufällig mutagenisiert werden. Die unterschiedlichen Mutationen sollen in den CP-defekten PPV `full-lengthA Klon eingefügt werden, welcher Virusassemblierung und Ausbreitung verhindert. Bei Infektion von CP-transgenen N. benthamiana Pflanzen, die eine rekonstituierende Rekombination ermöglichen, kann der Einfluss der NIb- und CI-Mutationen auf die Rekombinationsfähigkeit überprüft werden. Auf diese Weise sollen rekombinationsbeteiligte CI und NIb Genbereiche lokalisiert und näher charakterisiert werden. Die erhaltenen Ergebnisse sollen ein erweitertes Verständnis der an der Rekombination und Replikation beteiligten Proteinbereiche des CI und NIb von Potyviren ermöglichen und Rückschlüsse zur Entwicklung der Rekombinationsfunktion als Mechanismus der Adaption und Evolution erlauben.
病毒 RNA 的复制和重组是病毒 RNA 和 RNA-abhängigenRNA-Polymerasen (RdRp) 和 Helikasen 之间相互作用的本质。马铃薯病毒科家族存在于重组过程中,其重组机制是未知的。项目名称为李痘病毒蛋白 (PPV),通过重组、识别和重组来实现本地化。 Kürzlich konnte die 重组 verschiedener PPV Hüll Proteindefektmutanten 在 PPV Hüll Protein (CP) 转基因烟草 Pflanzen nachgewiesen werden 中。该系统使用转基因技术和病毒“全长克隆技术”来对病毒进行突变和筛选。 Potyviren 的重组与 RNA-abhängige-RNA-Polymerase/Replikase (NIb) 和 Helikase (CI) 的重组。 Das NIb- 和 das CI-Gen 会导致突变。 CP-defekten PPV“全长克隆病毒”中存在未发生突变的情况,请参阅病毒组装和 Ausbreitung verhindert。通过 CP 转基因 N. Benthamiana Pflanzen 的感染,进行重组重组,可以将 NIb- 和 CI-Mutationen 转化为 Rekombinationsfähigkeit überprüft werden。所有这些都需要重新组合 CI 和 NIb Genbereiche lokalisiert 和 näher charakterisiert werden。适应和进化机制的重组和复制的蛋白质组合和复制的解决方案。

项目成果

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