Development of therapeutic hepatitis peptide vaccine using a novel T cell receptor cloning system

使用新型 T 细胞受体克隆系统开发治疗性肝炎肽疫苗

• 批准号: 24791019
• 负责人: KOBAYASHI Eiji
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24791019/
• 关键词: ペプチドワクチン; T細胞受容体; Cytotoxic T lymphocyte; C型肝炎ウイルス

We have recently reported hTEC10 system (human TCR efficient cloning within 10 days) by which we can obtain TCR cDNAs from a single Ag-specific human T cell and determine their antigen specificity within 10 days. In this study, we applied this system to clone human Hepatitis C virus (HCV)-specific TCRs from patients with chronic hepatitis and compare affinities of cloned TCRs.To this end, we first predicted HLA-A24-restricted candidate epitopes of HCV components (Core, E1, E2, P7, NS2, NS3, NS4, NS5A, NS5B) using BIMAS system, then stimulated peripheral blood lymphocytes (PBLs) from the 10 patients who had HLA-A24 allel with the candidate peptide mixtures. As a result, we detected activated CD8+ T cells from PBLs of 4 patients. We are going to clone TCRs of the CD8+ T cells and compare affinities of cloned TCRs.

我们最近报道了hTEC 10系统（human TCR efficient cloning within 10 days），通过该系统，我们可以从单个Ag特异性人T细胞获得TCR cDNA，并在10天内确定其抗原特异性。本研究应用该系统从慢性肝炎患者中克隆了丙型肝炎病毒（HCV）特异性TCR，并比较了克隆的TCR的亲和力，首次预测了HCV组分的HLA-A24限制性候选表位（核心、E1、E2、P7、NS 2、NS 3、NS 4、NS 5A、NS 5 B），然后用候选肽混合物刺激来自10名患有HLA-A24缺陷的患者的外周血淋巴细胞（PBL）。结果，我们从4例患者的PBL中检测到活化的CD 8 + T细胞。我们将克隆CD 8 + T细胞的TCR，并比较克隆的TCR的亲和力。

项目成果

マイクロウェルアレイチップを用いたウサギモノクローナル抗体の迅速作製法の開発

微孔阵列芯片快速生产兔单克隆抗体方法的开发

• 发表时间: 2012
• 作者: 小澤龍彦;朴 秀虹;小林栄治;周越;櫻井宏明;安東嗣修;金 艾順;岸 裕幸;村口 篤
• 通讯作者: 村口 篤

Detection of antigen-stimulated cytokine-secretion in human T-cells at single cell levels on a live cell chip

在活细胞芯片上以单细胞水平检测人类 T 细胞中抗原刺激的细胞因子分泌

• 发表时间: 2013
• 作者: Kishi H;Jin A;Hamana H;Tajiri K;Hatakeyama S;Kobayashi E;Ozawa T;Nagai T;Muraguchi A
• 通讯作者: Muraguchi A

がんのTCR遺伝子治療にむけた候補TCR遺伝子の迅速クローニング法

用于癌症TCR基因治疗的候选TCR基因的快速克隆方法

• 发表时间: 2012
• 作者: Yoshikawa,K.;Matsumoto;Y.;Ito;J.;Shiojiri Y.;Reinherz E.;To M.;岸裕幸,小林栄治,水腰英四郎,小澤龍彦,金子周一,村口篤
• 通讯作者: 岸裕幸,小林栄治,水腰英四郎,小澤龍彦,金子周一,村口篤

T細胞受容体のクローニング方法

如何克隆 T 细胞受体

• 发表时间: 2013

Cloning and functional analysis of human telomerase reverse transcriptase (hTERT)-specific TCRs from peptide-vaccinated patients.

来自肽疫苗接种患者的人端粒酶逆转录酶 (hTERT) 特异性 TCR 的克隆和功能分析。

• 发表时间: 2013
• 作者: Kobayashi E;Nakagawa H;Hamana H;Kishi H;Ozawa T;Jin A;Muraguchi A
• 通讯作者: Muraguchi A