転写因子ＩＲＦ８に注目した網羅的ターゲット遺伝子同定による脊髄損傷の病態解明

通过以转录因子IRF8为重点的综合靶基因鉴定阐明脊髓损伤的病理学

• 批准号: 14J01375
• 负责人: 小早川 和
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J01375/
• 关键词: 脊髄損傷; マクロファージ; IRF8

マクロファージ自身の遊走能に影響を与えているのは、免疫染色の結果補体C5aの濃度勾配である事が分かった。安定的なC5aの濃度勾配を形成し、time lapse 位相差イメージングでマクロファージの遊走をリアルタイムに観察した結果、WTマクロファージは補体濃度が高い方向に向かって速く遊走するのに対し、IRF8-/-マクロファージは遊走スピードが著しく低下しており、補体濃度勾配中の遊走方向性も低下していた。IRF8-/-マクロファージのC5a濃度勾配中の走化性がWTよりも低下していた原因は、C5aに対する感受性の違いである可能性があったが、脊髄損傷前後のC5a受容体の遺伝子発現はIRF8-/-マウスとWT間で有意差がなかった。補体がマクロファージの遊走能を調節するもう一つのメカニズムとして、C5aの刺激によってautocrineされたATPと、ATPが加水分解されて産生されたADPが、プリン受容体を介するものがある。WTマウス損傷脊髄では種々のプリン受容体の遺伝子発現は脊髄損傷後に上昇するのに対し、IRF8-/-マウスの損傷脊髄では発現が有意に低下していて、損傷後の発現量増加も認めなかった。WTマウスにそれぞれIRF8+/+-EGFP+/+、もしくはIRF8-/--EGFP+/+マウス由来の細胞を骨髄移植したキメラマウスを作成し、脊髄損傷後にEGFP+/CD11b+/Ly6G-分画を末梢血からの浸潤マクロファージとしてFACSを用いて選択的に回収した。定量的qPCRの結果、WTマクロファージでは脊髄損傷後にプリン受容体の遺伝子発現が末梢血中の単球に比べて優位に上昇するのに対し、IRF8-/-マクロファージでは浸潤前の単球と比べて上昇せず、WTマクロファージよりも著しく低下していた。

マ ク ロ フ ァ ー wander の ジ itself can affect を に and え て い る の の は, immune dyeing results complement C5a の concentration hook with で あ る matter が points か っ た. The stable なC5a <s:1> concentration hooking を forms <s:1> and time lapse Phase difference イ メ ー ジ ン グ で マ ク ロ フ ァ ー ジ の wander を リ ア ル タ イ ム に 観 examine し た results, WT マ ク ロ フ ァ ー ジ は complement high concentration が に い direction to か っ て speed く wander す る の に し, seaborne IRF8 - / - マ ク ロ フ ァ ー ジ は wander ス ピ ー ド が the し く low し て お り, concentration of complement in the hook with low の wander directional も し て Youdaoplaceholder0 た. IRF8 - / - マ ク ロ フ ァ ー ジ の C5a concentration in the hook with の go voltinism が WT よ り も low し て い た は, C5a に す seaborne る susceptibility の violations い で あ る possibility が あ っ た が, before and after spinal marrow damage の C5a by body の but 伝 son 発 は modern IRF8 - / - マ ウ ス と WT で intentionally difference between が な か っ た. Complement が マ ク ロ フ ァ ー ジ の wander can regulate す を る も う a つ の メ カ ニ ズ ム と し て, C5a の stimulus に よ っ て autocrine さ れ た と, ATP が ATP hydrolysis さ れ て produce さ れ た ADP が, プ リ ン を interface by let body す る も の が あ る. WT マ ウ ス injury spinal marrow で は kind 々 の プ リ ン by body の but 伝 son 発 は modern に rise after injury of spinal marrow す る の に し, seaborne IRF8 - / - マ ウ ス の injury spinal marrow で は 発 が now intends to low に し て い て, injury after の 発 now amount raised も recognize め な か っ た. WT マ ウ ス に そ れ ぞ れ IRF8 + / + EGFP + / +, も し く は IRF8 - / - EGFP + / + マ ウ ス を origin の cells of bone marrow transplant し た キ メ ラ マ ウ ス を し, consummate after injury of spinal marrow に EGFP + CD11b + / Ly6G - points draw か を peripheral blood ら の infiltrating マ ク ロ フ ァ ー ジ と し て both FACS Youdaoplaceholder0 with を て select 択 's に to return を た. Quantitative qPCR の results, WT マ ク ロ フ ァ ー ジ で は after injury of spinal marrow に プ リ ン by let body の heritage 伝 child 発 が peripheral blood now の 単 ball に than べ て primacy に rise す る の に し, seaborne IRF8 - / - マ ク ロ フ ァ ー ジ で は before infiltration の 単 ball と than べ て rise せ ず, WT マ ク ロ フ ァ ー ジ よ り も the し く low し て い た.

项目成果

Engrafted Neural Stem/Progenitor Cells Promote Functional Recovery through Synapse Reorganization with Spared Host Neurons after Spinal Cord Injury.

• DOI: 10.1016/j.stemcr.2015.06.004
• 发表时间: 2015-08-11
• 期刊: Stem cell reports
• 影响因子: 5.9
• 作者: Yokota K;Kobayakawa K;Kubota K;Miyawaki A;Okano H;Ohkawa Y;Iwamoto Y;Okada S
• 通讯作者: Okada S

転写因子IRF8に注目した網羅的ターゲット遺伝子同定による脊髄損傷の病態解明

通过以转录因子IRF8为重点的综合靶基因鉴定阐明脊髓损伤的病理学

• 发表时间: 2014
• 作者: 小早川和;横田和也; 岩本幸英;岡田誠司
• 通讯作者: 岡田誠司

急性期高血糖は脊髄損傷の運動機能回復を悪化させる -脊髄損傷急性期の血糖管理-

急性期高血糖使脊髓损伤后运动功能恢复恶化 -脊髓损伤急性期的血糖管理-

• 发表时间: 2015
• 作者: 小早川和;岡田誠司;久保田健介;横田和也;芝啓一郎; 岩本幸英
• 通讯作者: 岩本幸英

Acute hyperglycemia impairs functional improvement after spinal cord injury in mice and humans

• DOI: 10.1126/scitranslmed.3009430
• 发表时间: 2014-10-01
• 期刊: SCIENCE TRANSLATIONAL MEDICINE
• 影响因子: 17.1
• 作者: Kobayakawa, Kazu;Kumamaru, Hiromi;Okada, Seiji
• 通讯作者: Okada, Seiji

転写因子IRF8は骨髄由来マクロファージの収束化を介して脊髄損傷後の機能回復を促進する- Time-Course RNA-Seqを用いた網羅的遺伝子発現解析 -

转录因子 IRF8 通过骨髓源性巨噬细胞的汇聚促进脊髓损伤后的功能恢复 - 使用 Time-Course RNA-Seq 进行综合基因表达分析 -

• 发表时间: 2015
• 作者: 小早川和;岡田誠司;久保田健介;横田和也;齋藤武恭;原正光; 岩本幸英
• 通讯作者: 岩本幸英