权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

高解像度ライブイメージングによる卵母細胞由来核小体の胚発生支持機能の解析

使用高分辨率实时成像分析卵母细胞来源的核仁支持胚胎发育的功能

基本信息

批准号：
14J02961
负责人：
京極博久
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J02961/
关键词：
卵母細胞核小体発生脱核小体 NPB NPM2

项目摘要

これまでの研究により，核小体を除去(脱核小体)した卵核胞期のマウス卵母細胞は，正常に成熟するが，受精後の前核期の核中に核小体は形成されず，胚は２細胞期で発生を停止するが，前核期で脱核小体した胚は正常に胚盤胞へ発生し，胚移植により正常な産仔を得られることを報告した。また，脱核小体胚と卵母細胞型の核小体が形成されないNpm2 KOマウス胚を用いた実験により，これらの胚は，発生過程で卵母細胞型の核小体を再形成することはなかったが、体細胞型の核小体を新たに形成することを報告した。これにより，卵母細胞型の核小体は前核期以降の胚発生に必須ではないこと，卵母細胞型の核小体がなくとも胚は体細胞型の核小体を新たに形成することが明らかとなった。また，これまでの結果より卵母細胞型の核小体が必須な時期は受精後から前核期後半までの間であると明らかになっている。この時期の卵母細胞型の核小体の個数やサイズが、その後の発生に重要であることも示唆されており，この卵母細胞型の核小体の形態，個数，体積がどのように制御されているかに着目し実験を開始した。まず，卵母細胞型の核小体の個数が何によって変化するのかを調べた結果，前核中の卵母細胞型核小体の数は，核と核小体の比によって変化することが明らかになった。さらに，体細胞核移植胚では，偽前核中の卵母細胞型核小体の個数が多いことが異常の一つとして以前から報告されていることに着目し，余剰な卵母細胞型核小体を体細胞核移植胚に顕微注入することで，偽前核中の核小体の個数の異常を改善できないか試みた。余剰な核小体を顕微注入したところ，偽前核中の核小体数が受精卵へと近づき，2細胞期への進行を促進させることを明らかにした。これにより，卵母細胞型の核小体は，正しい前核形成を行い2細胞期胚へ発生するめの何らかの機能（ゲノムリプログラミング，核の脱濃縮等）を持っていると考えられる。

In this study, nucleosomes were removed (anucleosomes) from oocytes at the nuclear stage, oocytes matured normally, nucleosomes formed in the nucleus at the pre-nuclear stage after fertilization, embryos developed at the 2-cell stage, anucleosomes developed normally from blastoderm cells, embryos were transferred normally, and embryos were born at the embryo transfer stage. The formation of nucleosomes of the anucleated embryo and oocyte type is reported in this paper. The nucleosomes of the anucleated embryo and oocyte type are re-formed during the development process. The oocyte type nucleosomes are required for embryo development at the pre-nuclear stage, while the oocyte type nucleosomes are required for embryo development at the somatic stage. The result is that oocyte-type nucleosomes must be in the post-fertilization, post-nuclear and post-nuclear phases. The number of nucleosomes of oocyte type in this period is important for development. The morphology, number and volume of nucleosomes of oocyte type are controlled. As a result, the number of oocyte nucleosomes in the pronucleus and the ratio of nucleosomes to nucleosomes in the pronucleus are clearly regulated. The number of oocyte-type nucleosomes in the pseudo-pronucleus of somatic cell nuclear transfer embryos was increased and the number of abnormal nucleosomes in the pseudo-pronucleus was improved by microinjection of oocyte-type nucleosomes into somatic cell nuclear transfer embryos. The number of nucleosomes in the pseudo-pronucleus is increased by the number of nucleosomes in the 2-cell stage. The oocyte-type nucleosomes are in the process of pre-nucleus formation and 2-cell embryo development.