核小体ストレス応答を利用して抗癌剤耐性を解除する新たな小児白血病治療の開発

开发一种新的儿童白血病治疗方法，利用核仁应激反应消除抗癌药物耐药性

• 批准号: 22K07824
• 负责人: 中川 俊輔
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07824/
• 关键词: 小児白血病; 核小体ストレス応答; P53; 免疫染色; 抗腫瘍薬多剤耐性

核小体ストレス応答は，薬剤などのストレスによって核小体からリボソーム蛋白質L11（RPL11）が核内に放出され，MDM2と結合することによって癌抑制因子P53を制御する抗腫瘍システムである。本研究では，1) 診断時の白血病細胞のRPL11発現低下はALLの予後不良因子であるか？，2) RPL11の発現を低下させる機序の解明，3) RPL11の発現を回復させる方法を見出し，小児ALLの多剤耐性を解除すること，の３つを目標としている。2022年度は，主に1)の診断時のRPL11の発現を評価する方法について実験を行った。診断時にRPL11の発現が低い症例は薬剤感受性が悪く，予後不良の可能性が高いと推測できる。これを評価するためにはRPL11発現量を絶対的に比較する技術が必要である。免疫染色は正常細胞と白血病細胞を形態的に区別して蛋白発現を評価できるため，評価方法として適していると考えた。これまでに免疫染色が可能なRPL11抗体は市販されていないが，研究分担者の河原は株式会社医学生物学研究所と共同で免疫染色が可能なRPL11抗体を作製しており，実用化に向けて開発をすすめている。 申請者は，この独自に開発されたRPL11抗体を用いて検討を始めた。まず最初に，ALLの細胞株を用いて，RPL11抗体による免疫染色を行った。様々な条件を検討した結果，核小体に特異的に発現するNucleolinに一致してRPL11が結合する条件を見出した。次に，患者検体を用いてRPL11の免疫染色を行い，細胞株と同様の条件で初発時の患者検体の白血病細胞のRPL11を染色できることが確認できた。今後は免疫染色によるRPL11の定量化を実現させる。免疫染色でRPL11が定量化できたら初発患者の骨髄検体を用いてRPL11の発現量と予後との関連を明らかにする。

Nucleosome ス ト レ ス 応 answer は, 薬 tonic な ど の ス ト レ ス に よ っ て nucleosome か ら リ ボ ソ ー ム protein L11 (RPL11) が nuclear に release さ れ, MDM2 と combining す る こ と に よ っ て cancer suppressor P53 を suppression す る resistance swollen sores シ ス テ ム で あ る. In this study, で で, 1) the leukemia cell line <s:1> RPL11 shows a low level of である ALL at the time of diagnosis, followed by adverse factors である である? Low, 2) RPL11 の 発 now を さ せ る machine sequence の interpret, 3) RPL11 の 発 reply now を さ せ る method を see し, small where ALL の tonic more patience を remove す る こ と, の 3 つ を target と し て い る. In 2022, に, the main author に1) the occurrence of <s:1> RPL11 during <s:1> diagnosis を evaluation 価する method に った て て laboratory を conduct った. At the time of diagnosis, にRPL11 diagnosis shows a が low に case of drug sensitivity が悪く, and the possibility of adverse reactions is が high と と. It is speculated that で で る る. The <s:1> れを evaluation of the 価するために 価するために RPL11 occurrence volume を absolute に comparison する technology が necessary である. Dyeing は normal immune cells と を forms of leukemia cell に difference し て protein 発 now を review 価 で き る た め, review 価 method と し て optimum し て い る と exam え た. こ れ ま で に immune dyeing が may な RPL11 antibody は city vendor さ れ て い な い が, study the river who の share the original は joint で institute of medical biology と immune dyeing が may な RPL11 antibody を cropping し て お り, be to け in turn に て open 発 を す す め て い る. The applicant, を, <s:1>, <s:1>, independently に, developed されたRPL11 antibody を and used に て検 to seek を and めた. Youdaoplaceholder0 Initially に, ALL <s:1> cell lines を were immunostained を with を て, RPL11 antibody による and った. Others 々 な conditions を beg し 検 た results, nucleosome に specific に 発 now す る Nucleolin に consistent し て RPL11 が combining す を る conditions show the し た. 検 body を に, patients with い て RPL11 の dyeing を い, immune cell lines と with others early で 発 の conditions when の の 検 body in patients with leukemia cells の RPL11 を dyeing で き る こ と が confirm で き た. In the future, <s:1> immunostaining によるRPL11 <s:1> quantification を is manifested in させる. Immune dyeing で RPL11 が quantitative で き た ら early 発 の in patients with bone marrow を 検 body with い て RPL11 の 発 now after と to と の masato even を Ming ら か に す る.