权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

網膜神経節細胞特異的タンパク質Ｈｅｒｍｅｓによるアポトーシス制御機構の解析

视网膜神经节细胞特异性蛋白Hermes调控细胞凋亡机制分析

基本信息

批准号：
14J04370
负责人：
古川真理
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J04370/
关键词：
神経RNA顆粒網膜神経節細胞神経RNP顆粒神経分化

项目摘要

網膜は複数種の神経細胞から構成される組織である。RNA結合タンパク質HERMESは網膜組織の最内側面に位置する網膜神経節細胞（以下、RGC）に強く発現し、RGC軸索の終末における分岐形成に必須の働きをすることが示唆されている。これまでに私は、マウス網膜由来の神経系細胞株RGC-5を用いた解析から、薬剤刺激によって神経様に分化させたRGC-5細胞において、HERMESがストレス顆粒の代表的な構成因子として知られるG3BP1や核局在性RNA結合タンパク質NonO、PSFなどとともに、軸索や樹状突起へのRNA輸送および局所的な翻訳制御に働く神経RNA顆粒を形成することを明らかにした。興味深いことに、NonO、PSFは分化誘導前のRGC-5細胞では核にのみ存在したことから、RGC-5細胞の神経様分化をきっかけとしてNonO、PSFの核外移行、および、HERMES、G3BP1などとの細胞質性顆粒形成が誘導されることが示唆された。そこで私は、神経様分化時に働くNonO、PSFの核外移行制御機構の解明を目標に、RGC-5細胞をモデル系として翻訳後修飾に着眼した解析を行っている。阻害剤やsiRNAによる検討から、NonO、PSFの核外移行、および、細胞質における顆粒形成がSUMO化修飾によって制御されることを見出した。また、RGC-5細胞においてNonO自身がSUMO化されていることを確認しており、SUMO化の標的になり得る配列に変異を導入した変異型NonOは、分化誘導前のRGC-5細胞においても細胞質で顆粒を形成することを明らかにした。さらにRGC-5細胞の神経様分化に伴って、特定の脱SUMO化酵素のタンパク質量が増加することを見出した。現在は、SUMO化によるタンパク質の細胞内局在制御機構の詳細について、更なる検証を行っている。

The retina is composed of a plurality of neurons. RNA binding proteins are strongly expressed in retinal ganglion cells (RGC) located at the innermost surface of retinal tissue, and are essential for differentiation of RGC axons. RGC-5 cell line derived from the retina was analyzed for the presence of a protein, a protein, RNA transport by axons and dendrites is controlled by RNA particles. RGC-5 cells were induced to undergo nuclear migration before induction of differentiation, and RGC-5 cells were induced to undergo nuclear migration before induction of differentiation. In addition, in the case of cell differentiation, non-O, PSF, and RGC-5 cells, the expression of non-O, PSF, and RGC-5 cells was modified to analyze the expression of non-O, PSF, and RGC-5 cells. Inhibition of siRNA expression, non-O, PSF exonuclear migration, cytosolic particle formation and SUMO modification have been demonstrated. RGC-5 cells were confirmed to be SUMO-modified by non-O itself, and RGC-5 cells before differentiation were induced to form cytoplasmic granules. In addition, it was found that the quality of RGC-5 cells was increased due to the increase in the concentration of certain de-SUMO enzymes. Now, SUMO can be used to control the cellular structure in detail, and the test can be carried out.