真核生物鞭毛による運搬機構を有する物質内包リポソームの創製

利用真核鞭毛创建具有运输机制的物质封装脂质体

基本信息

批准号：
14J07064
负责人：
森宣仁
金额：
$ 2.05万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、物質内包リポソームによるドラッグデリバリーシステムの評価基盤として、灌流可能な血管流路を有した皮膚モデルの構築、評価及び応用可能性の検証を目指した。皮膚モデルは、化粧品や薬剤の試験に使用されている。しかしながら、これまでの皮膚モデルには灌流可能な血管構造が存在せず、外部から培養液や試薬を灌流することが困難だった。報告者は昨年度、灌流可能な血管構造を有した皮膚モデルを構築した。本年度は、構築した皮膚モデルの形態・機能的な評価、及び創薬分野における応用可能性の検証を実施した。まず形態の評価を実施した。本皮膚モデルの表皮は、従来皮膚モデル相当の厚みであり、分化も確認された。さらに血管流路壁面には内皮細胞マーカであるCD31が検出された。機能の観点では、表皮がバリア機能を有することを電気計測により確認し、また血管流路については分子サイズ選択的な透過性及び酸素・栄養供給能があることが確認された。これらの結果から、本皮膚モデルが、皮膚モデル及び血管のモデルとしての基本的な性質を備えていることが示された。本皮膚モデルの表皮に、カフェイン及び二硝酸イソソルビド(ISDN)を塗布し、真皮下の培地及び血管流路内の培地を一定時間ごとにサンプリングした。この結果、両薬剤がいずれのサンプルからも検出され、経時的に累積透過量が増加した。また、ISDN透過量はカフェイン透過量より大きかったが、これはヒト皮膚における両薬剤の透過性の違いと一致した傾向である、さらにVEGFを培地中に添加したところ、血管流路内の培地への透過量が増加した。生体においてもVEGFを添加することで血管の透過性が上昇することが知られており、従って本研究の血管流路が生体に類似した内皮機能を有していることが示唆された。以上の結果から、本研究の皮膚モデルは化粧品・医薬品の開発や皮膚の基礎研究分野に貢献すると期待できる。

今年，我们旨在使用灌注的血管流通通道来构建，评估和验证皮肤模型的应用潜力，以作为使用物质包含的脂质体的药物输送系统的评估基础。皮肤模型用于化妆品和药物测试。但是，先前的皮肤模型没有可灌注的血管结构，因此很难从外部灌注培养基和试剂。去年，记者构建了一种具有灌注血管结构的皮肤模型。今年，我们对构造的皮肤模型的形态和功能进行了评估，并验证了它们在药物发现领域的应用。首先，评估了形态。该皮肤模型的表皮与常规皮肤模型一样厚，并且还确认了分化。此外，在血管通道的壁上检测到了一种内皮细胞标记CD31。从功能性的角度来看，通过电测量证实了表皮具有屏障功能，并且血管流动通道具有分子尺寸渗透性，氧气和养分供应能力。这些结果表明，该皮肤模型具有皮肤模型和血管模型的基本特性。将咖啡因和异肌二硝酸酯（ISDN）应用于该皮肤模型的表皮，并以定期时间间隔采样了多层培养基和血管通道中的培养基。结果，在两个样品中都检测到两种药物，并且累积渗透性随时间增加。此外，ISDN的渗透性大于咖啡因的渗透性，这是一种趋势，与两种药物在人皮肤中的渗透性差异一致。此外，当将VEGF添加到培养基中时，血管通道中培养基的渗透性会增加。众所周知，在活生物体中添加VEGF也会增加血管的渗透性，因此建议这项研究中的血管流动通道具有与生物体中类似的内皮功能。基于上述结果，预计这项研究中的皮肤模型将有助于化妆品和药品的发展以及皮肤基础研究领域。