ＳＲＹ標的遺伝子および初期卵巣化因子の同定と発現解析

SRY靶基因及早期卵巢化因子的鉴定及表达分析

• 批准号: 14J09465
• 负责人: 三浦 健人
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J09465/
• 关键词: 性決定; 卵巣; 精巣; SRY; 性の可塑性; セルトリ細胞; 顆粒層細胞; SOX9; 顆粒膜細胞

マウス胎子XX卵巣を父性環境下 (雄ヌードマウス腎臓被膜下への移植) で発生させると、生殖腺が発生初期の未分化な状態に戻り、精巣化する (XX精巣化モデル)。本研究は、このXX精巣化モデルを用いて、「①精巣決定遺伝子SRYの標的遺伝子」および「②初期卵巣化因子」の同定を行うことを目的に行われている。①申請者は、SRYの新たな標的遺伝子を同定するために、XX精巣化の過程で未分化な状態に戻ったXX生殖腺に異所的なSRYを誘導し、遺伝子発現を解析した。マイクロアレイ解析の結果、発現が上昇した遺伝子の中には、セルトリ細胞特異的に発現している転写因子が含まれており、それらの発現は、Sox9発現と高い正の相関を示していた。また、これら３つの転写因子は、胎生期の野生型XYまたはSRY恒常発現型XX生殖腺においても高発現しており、胎生期の精巣決定においてSRY標的遺伝子として機能している可能性が示された。②申請者は、XX精巣化の過程での遺伝子発現変動を、マイクロアレイにより継時的に解析した。その結果、XX精巣化の進行に伴い、顆粒膜細胞特異的遺伝子群のうち、約25％の遺伝子が発現の減少を示すことが分かった。これらの発現が減少した遺伝子の中に、初期卵巣化に関わる遺伝子が含まれている可能性がある。対照的に、XX精巣化の進行に伴い、セルトリ細胞に特異的な遺伝群の約25％の遺伝子が発現の増加を示すことが分かった。XX精巣化の過程で発現が上昇した遺伝子に関して、CRISPR-Cas9システムを用いてノックアウトしたマウスを作製した。ノックアウトマウスの移植卵巣では、野生型の移植卵巣と比較して、退行中の卵胞数が有意に増加していた。これらの結果から、ノックアウトした遺伝子は、移植卵巣の雄性化過程における卵胞の維持に関与していることを明らかにした。

The development of the fetus in a paternal environment (male or female subcapsular transplantation), the undifferentiated state of the gonads at the initial stage of development, and the refinement of the fetus (XX refinement) In this study, we focused on the application of "XX refinement","① refinement determination gene SRY target gene" and "② initial egg transformation factor". (1) The applicant shall determine the identity of SRY and its new target gene, and analyze the identity of SRY and its new target gene in the process of XX refinement. The results of the analysis, discovery, increase in the number of genes, cell-specific discovery, writing factors, and Sox9 discovery are highly correlated. The gene expression factor of SRY in wild type XY and SRY in viviparous stage is higher than that in XX gonad, and the gene expression factor of SRY in spermatozoa in viviparous stage is higher than that in XX gonad. 2. The applicant shall analyze the process of XX refinement and the time of its occurrence. As a result, XX refinement was accompanied by a decrease in the occurrence of granular membrane cell-specific genes by about 25%. The occurrence of this disease is related to the middle and early stages of egg development, and the possibility of the occurrence of this disease is high. About 25% of the cell-specific gene population in the study group showed an increase in gene expression in response to the progress of gene refinement. The process of XX refinement has been developed and controlled by CRISPR-Cas9. The number of eggs in the retrogression process was intentionally increased compared with wild-type and transplanted eggs. The result is that the transfer of eggs is related to the maintenance of eggs and the process of masculinization.

项目成果

雄性環境下で起こるマウス胎子XX生殖腺のSRY非依存的精巣化について

雄性环境中小鼠胎儿 XX 性腺的 SRY 独立睾丸化

• 发表时间: 2015
• 作者: 三浦健人;張替香生子;中口真有;金井克晃 （東京大学 獣医解剖学）
• 通讯作者: 金井克晃 （東京大学 獣医解剖学）

雄性環境下で起こるマウス胎子生殖腺のSRY非依存的精巣化とその分子経路

雄性环境中小鼠胎儿性腺的SRY非依赖性睾丸化及其分子途径

• 发表时间: 2015
• 作者: 三浦健人1;張替香生子1;中口真有1;冨田絢子1;恒川直樹2;九郎丸正道1;金井克晃1 (1東大 獣医解剖;2日大 生物資源科学)
• 通讯作者: 2日大 生物資源科学)

哺乳類の卵巣の性的可塑性と疾患

哺乳动物卵巢性可塑性与疾病

• 发表时间: 2017
• 作者: 三浦健人;金井克晃
• 通讯作者: 金井克晃

SRY-independent masculinization and its global changes of gene expression in mouse fetal gonads

小鼠胎儿性腺中不依赖SRY的雄性化及其基因表达的整体变化

• 发表时间: 2016
• 作者: Kento Miura;Kyoko Harikae;Mayu Nakaguchi;Yoshikazu Hirate;Hinako Takase;Naoki Tsunekawa;Kanai-Azuma Masami;Masamichi Kurohmaru;Yoshiakira Kanai
• 通讯作者: Yoshiakira Kanai

Molecular Characterization of a Partial Masculinization in Embryonic Ovaries Grafted into Male Nude Mice

移植到雄性裸鼠的胚胎卵巢部分雄性化的分子特征

• 发表时间: 2016
• 作者: Kento Miura;Kyoko Harikae;Mayu Nakaguchi;Ayako Tomita;Yoshikazu Hirate;Masami Kanai-Azuma;Masamichi Kurohmaru and Yoshiakira Kanai
• 通讯作者: Masamichi Kurohmaru and Yoshiakira Kanai