生物活性の＂クロスチェック＂が可能な環状ペプチドセンサーの創製

创建能够“交叉检查”生物活性的环肽传感器

• 批准号: 14J09620
• 负责人: 岡田 洋平
• 金额: $ 2万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J09620/
• 关键词: 環状ペプチド; 液相合成; 可溶性担体

近年，ペプチドは低分子医薬と抗体医薬の利点を併せ持つ次世代の医薬品候補化合物として大きな注目を集めている．ペプチド創薬においては，インスリンに代表されるペプチドホルモンだけでなく，これまでに機能が明らかとなっているタンパク質の活性フラグメントもまた有力なリード化合物となる．中でも，生物活性を高めるとともに消化酵素に対する耐性を得る上で分子内に架橋構造を導入することが非常に効果的であり，環状ペプチドの設計，合成が広く研究されてきた．しかしながら，活性測定に必要な物質量を供給することは依然として極めて困難であり，さらには活性測定法の構築にも膨大な時間と労力がかけられている．すなわち，コストや生産規模に優れた合成法の確立に加え，限られた物質量で迅速かつ簡便に活性測定を実施することができれば，環状ペプチド創薬のブレイクスルーになることが期待される．このような学術的背景を踏まえ，申請者らは疎水性ベンジルアルコールを可溶性担体として用いる液相ペプチド合成法の研究開発を推進してきた．本法では，担体に結合したペプチドを貧溶媒添加によって選択的に沈殿させることで，カラムクロマトグラフィー等の分離操作を挟まずに多段階の化学変換を実現できる．本研究では申請者らのこれまでの液相ペプチド合成法の技術をさらに発展させ，環状ペプチドの合成に特化させることを目的とした．その結果，本法に電気化学的な手法を組み合わせることで，電子そのものを試薬として効率的にジスルフィド結合含有ペプチドを合成できることが見出された．また，本法を応用することで非天然型架橋を有する環状ペプチドの合成をグラムスケールで達成し，一部のペプチドについては細胞ならびにマウスを用いた活性試験を実施し，リードとなる天然型架橋のものよりも有効であることを明らかにした．

In recent years, ペ プ チ ド は low molecular medicine 薬 と antibody medical 薬 の tartness を and せ つ nextgen の medical 薬 product alternate compound と し て big き な attention を set め て い る. ペ プ チ ド gen 薬 に お い て は, イ ン ス リ ン に representative さ れ る ペ プ チ ド ホ ル モ ン だ け で な く, こ れ ま で に function が Ming ら か と な っ て い る タ ン パ ク qualitative の active フ ラ グ メ ン ト も ま た powerful な リ ー ド compound と な る. In で も を high biological activity, め る と と も に digestive enzyme に す seaborne る patience を up る で intramolecular に bridge structure を import す る こ と が very に unseen fruit で あ り, annular ペ プ チ ド の design, synthesis が hiroo く research さ れ て き た. し か し な が ら, activity determination に な content quality を supply necessary す る こ と は still と し て extremely め て difficult で あ り, さ ら に の は activity determination method to construct に も swelled な time と 労 force が か け ら れ て い る. す な わ ち, コ ス ト や production scale に optimal れ た synthesis の establish に え, limit ら れ た content quality で quickly か つ simple に activity determination を be applied す る こ と が で き れ ば, annular ペ プ チ ド gen 薬 の ブ レ イ ク ス ル ー に な る こ と が expect さ れ る. Tread こ の よ う な academic background を ま え, applicants ら は 疎 water-based ベ ン ジ ル ア ル コ ー ル を soluble supporter と し て in い る liquid ペ プ チ ド synthesis の research open 発 を propulsion し て き た. This law で は, supporter に combining し た ペ プ チ ド を poor solvent add に よ っ て sentaku of に Shen Dian さ せ る こ と で, カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー の separation operations such as を carry ま ず に more Duan Jie の chemical variations in を be presently で き る. This study で は applicants ら の こ れ ま で の liquid ペ プ チ ド synthesis の technology を さ ら に 発 exhibition さ せ, annular ペ プ チ ド の synthetic に specialized さ せ る こ と を purpose と し た. そ の as a result, the manipulations に electric 気 chemical な を group み close わ せ る こ と で, electronic そ の も の を try 薬 と し て sharper rate に ジ ス ル フ ィ ド combination containing ペ プ チ ド を synthetic で き る こ と が shows さ れ た. ま た, this law を 応 with す る こ と で non natural bridge を have す る annular ペ プ チ ド の synthetic を グ ラ ム ス ケ ー ル で し concluded, a の ペ プ チ ド に つ い て は cells な ら び に マ ウ ス を with い た activity test を be し, リ ー ド と な る type natural bridge の も の よ り も have sharper で あ る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

Electrochemically Active Crosslinking Reaction for Fluorescent Labeling

用于荧光标记的电化学活性交联反应

• 发表时间: 2014
• 作者: Kim;S.; Shimada;K.; Okada;Y.; Chiba;K.
• 通讯作者: K.

Organic Electrochemistry, 5th ed.

有机电化学，第五版。

• 发表时间: 2015
• 作者: Chiba;K.; Okada;Y.
• 通讯作者: Y.

Electrochemically-Induced Radical Cation Diels-Alder Reactions Assisted By “Redox Tag Strategy

“氧化还原标签策略”辅助下的电化学诱导自由基阳离子狄尔斯-阿尔德反应

• 发表时间: 2015
• 作者: Yamaguchi;Y.; Okada;Y.; Chiba;K.
• 通讯作者: K.

可溶性担体を用いた液相ペプチド合成プロセス

使用可溶性载体的液相肽合成工艺

• 发表时间: 2015
• 作者: Yamaguchi;Y.; Okada;Y.; Chiba;K.;岡田洋平，神谷秀博，千葉一裕
• 通讯作者: 岡田洋平，神谷秀博，千葉一裕

Understanding the reactivity of enol ether radical cation: Investigation of electrochemical [2 + 2] cycloaddition reactions

了解烯醇醚自由基阳离子的反应性：电化学 [2 2] 环加成反应的研究

• 发表时间: 2014
• 作者: Yusuke Yamaguchi;Yohei Okada;Kazuhiro Chiba
• 通讯作者: Kazuhiro Chiba