イヌｉＰＳ細胞を用いた血小板減少症の治療に向けた応用的基盤技術の開発

犬iPS细胞治疗血小板减少症应用基础技术的开发

• 批准号: 14J12063
• 负责人: 西村 俊哉
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Osaka Prefecture University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J12063/
• 关键词: 胚体外内胚葉; イヌ; 肝細胞; iPS細胞; 単一細胞継代; フィーダーレス

今年度は、昨年度に作製したイヌ人工誘導胚体外内胚葉細胞様株(iXEN細胞様株 )を用い血小板への分化誘導を行うに当たり、その性状をさらに解析した結果、本細胞は骨髄ストロマ細胞であるOP9細胞と共培養することで、肝細胞特異的なマーカーであるアルブミンとCYP3A4遺伝子を発現する肝細胞や、毛細胆管膜マーカーであるMRP2タンパクを発現する胆管上皮細胞に分化することを見出した。これまで、他種動物においてもXEN細胞の肝細胞への分化能については報告がなく、本知見はXEN細胞の新たな可能性を提示するものである。また、本細胞株を間葉系幹細胞(MSC)培地にて分化誘導したところ、脊髄損傷や自己免疫疾患の治療に応用されるMSCと同様の表面抗原を発現するイヌMSC様細胞が得られた。次に、イヌiXEN細胞の臨床応用に向けて、遺伝子組換えの無いイヌiXEN細胞を目指し、細胞質内で遺伝子を複製することができるセンダイウイルスベクター(SeVdp)を用いてイヌiXEN細胞の作製を試みたところ、イヌiXEN細胞様細胞が得られ、本細胞はSeVdpの発現が消失していた。また、本細胞はXEN細胞マーカーを発現し、肝細胞および胆管上皮細胞への分化能を有していたことから、遺伝子組換えの無いイヌiXEN細胞様細胞の作製に成功した。以上のことから、今年度は、イヌiXEN細胞様株が成熟肝細胞および胆管上皮細胞への分化能を有していることを明らかにし、さらに臨床応用に適した遺伝子組換えの無いイヌiXEN細胞様細胞を樹立した。本研究により得られた成果は、これまで培養維持可能な幹細胞が存在しないことにより停滞していた獣医再生医療を飛躍的に進めると考えられ、今後、血小板を含めた他胚葉への分化や、本細胞を用いたヒト疾患モデルの作製など発展が期待される。

In this year's and last year's production, the embryo cell line was artificially induced in vitro (iXEN cell strain) Platelet differentiation induction in vitro, analysis of traits, co-culture of OP9 cells in vitro, hepatocyte specific induction of CYP3A4 gene in vitro Bile duct epithelial cells differentiate into two different types of cells. This study suggests that the ability of XEN cells to differentiate into hepatocytes from other animals may be a new possibility. This cell line is derived from mesenchymal stem cells (MSCs) that are cultured for induction of differentiation, spinal cord injury, and treatment of immune disorders. In addition, iXEN cells have been used in clinical trials, and the expression of gene components has been reduced. iXEN cells have been designated as target cells, and intracellular gene replication has been reduced. The development of XEN cells, the differentiation of hepatocytes and bile duct epithelial cells, and the successful production of XEN cells The above results show that the differentiation ability of iXEN cell strains from mature hepatocytes to bile duct epithelial cells is very high, and that the differentiation ability of iXEN cell strains from mature hepatocytes to bile duct epithelial cells is very high. The results of this study indicate that stem cells can be maintained in culture and that there is a potential for progress in regenerative medicine. In the future, platelets, including other embryonic leaves, can be used to control disease development.

项目成果

イヌiPS細胞のマトリゲル上での培養と間葉系幹細胞への分化誘導

狗 iPS 细胞在 Matrigel 上培养并诱导分化为间充质干细胞

• 发表时间: 2016
• 作者: Unezaki N;Nishimura T;Kanegi R;Wijesekera DP;Sugiura Kikuya;Hatoya S;Kawate N;Tamada H;Imai H and Inaba T.;西村 俊哉
• 通讯作者: 西村 俊哉

イヌiPS細胞の製造方法

犬iPS细胞的制备方法

• 发表时间: 2016

Feeder-independent and serum-free canine induced pluripotent stem cells reprogrammed by a drug-inducible system

通过药物诱导系统重新编程的不依赖饲养层且无血清的犬诱导多能干细胞

• 发表时间: 2015
• 作者: Unezaki N;Nishimura T;Kanegi R;Wijesekera DP;Sugiura Kikuya;Hatoya S;Kawate N;Tamada H;Imai H and Inaba T.;西村 俊哉;西村 俊哉
• 通讯作者: 西村 俊哉

Canine iPS Cell-Derived Platelets have Applications in Veterinary and Human Medicine

犬 iPS 细胞衍生的血小板在兽医和人类医学中的应用

• 发表时间: 2014
• 作者: Unezaki N;Nishimura T;Kanegi R;Wijesekera DP;Sugiura Kikuya;Hatoya S;Kawate N;Tamada H;Imai H and Inaba T.;西村 俊哉;西村 俊哉;西村 俊哉
• 通讯作者: 西村 俊哉

Generation of multipotent canine extraembryonic endoderm-like cells via the formation of induced pluripotent stem cells.

通过诱导多能干细胞的形成产生多能犬胚胎外内胚层样细胞。

• 发表时间: 2016
• 作者: Unezaki N;Nishimura T;Kanegi R;Wijesekera DPH;Hatoya S;Sugiura K;Kawate N;Tamada H;Imai H;Inaba T.
• 通讯作者: Inaba T.