シロイヌナズナのＣＬＶ３ペプチドの下流で機能するＳＵＭＯ化タンパク質の単離・解析

拟南芥 CLV3 肽下游功能的 SUMO 化蛋白的分离和分析

基本信息

批准号：
14J40052
负责人：
山口泰華
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Kumamoto Health Science University (2016-2017)Kumamoto University (2014-2015)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J40052/
关键词：
シロイヌナズナ CLE遺伝子 CLV3

项目摘要

本研究は、シロイヌナズナを実験生物として、その器官形成における分裂組織の活性調節機構を明らかにするために、CLV3をはじめ、シロイヌナズナにおける32種類のCLEペプチドホルモンのシグナル伝達系の作用様式に着目して解析を進めた。CLE遺伝子は、植物の様々な器官に幅広く分布・機能重複を示し、その器官形成に重要な働きを示す。研究計画開始当初は、茎頂部の形態形成におけるCLV3遺伝子のシグナル経路にのみ焦点をあてて研究遂行に臨んだが、CLV3を含むCLE遺伝子群は発現様式やペプチドの分子機能が非常に類似しているため、これら遺伝子の機能を網羅的に解析しなければ分子機構の解明はできないと考えた。そこでまず、3 2種類すべてのCLE遺伝子欠損リソースの樹立を目指した。CRISPR法による網羅的なCLE遺伝子欠損体作成を進め、CLE遺伝子欠損体リソースが完成した。リソースは学会等を通じて公表し、理研BRCとの連携のもと、多くの研究者へ供与して共同研究へと発展した。一方で、CLE遺伝子の正確な発現様式を明らかにするために、根端部におけるCLE遺伝子群の網羅的発現解析をRT-PCR法(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)を行った。その結果から、これまでレポーター解析により根端部で発現していると報告されていた幾つかのCLE遺伝子が、実際にはその発現はほとんど検出されないことが明らかになった。作成したCLE遺伝子欠損体リソースの表現型解析では、CLE41とCLE44の二重欠損体を作成して解析し、CLE44欠損体の表現型などの新しい知見を得た。当該年度には、これらのデータを元に投稿論文の執筆を行った。投稿論文は植物生理学会誌(Plant and Cell Physiology)平成29年11月号に掲載された。

这项研究的重点是拟南芥中32个CLE肽激素信号系统的作用模式，包括CLV3在内，以阐明使用拟南芥中器官发生中分生组织活性调节的机制。 CLE基因在植物的各种器官中表现出广泛的分布和重叠功能，对于器官形成很重要。当研究项目首次启动时，进行的研究仅集中在顶端茎的形态发生中CLV3基因的信号途径上，但是包括CLV3在内的CLE基因组具有非常相似的表达模式和肽的分子功能，因此我们认为，如果不全面地分析这些基因的分子机制，则无法阐明这些基因的分子机制。因此，我们首先旨在建立在所有三种和两种类型中都缺乏CLE基因的资源。使用CRISPR方法创建了全面的CLE基因缺乏症，并完成了CLE基因缺乏资源。资源是通过学术社会和其他组织出版的，并与Riken BRC合作，将其提供给许多研究人员并发展为联合研究。另一方面，为了阐明CLE基因的精确表达，使用RT-PCR（逆转录聚合酶链反应）来全面分析CLE基因在根端的表达。结果表明，报告基因分析表明，在实践中很少检测到以前报道在根边缘表达的几个CLE基因。在对产生的CLE基因缺乏资源的表型分析中，创建和分析了CLE41和CLE44的双重缺陷，并获得了新的发现，包括CLE44缺陷的表型。在这一年中，提交的论文是根据这些数据撰写的。提交的论文发表在2017年11月的植物和细胞生理学上。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A Collection of Mutants for CLE-Peptide-Encoding Genes in Arabidopsis Generated by CRISPR/Cas9-Mediated Gene Targeting

DOI：
10.1093/pcp/pcx139
发表时间：
2017-11
期刊：
Plant and Cell Physiology
影响因子：
4.9
作者：
Yasuka L. Yamaguchi;Takashi Ishida;M. Yoshimura;Yuko Imamura;Chie Shimaoka;S. Sawa
通讯作者：
Yasuka L. Yamaguchi;Takashi Ishida;M. Yoshimura;Yuko Imamura;Chie Shimaoka;S. Sawa

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