ナノＤＮＡワクチンを基盤とした樹状細胞エンジニアリングと難治性癌治療への展開

樹状細胞ワクチンは、抗原特異的な免疫応答に重要である「樹状細胞」を用いて、人為的に抗原特異的免疫を誘起する技術である。申請者はこれまで、樹状細胞に対し、効率的に抗原遺伝子導入・免疫活性化を可能とするDNA封入ナノ粒子の開発に成功している。平成29年度においては、平成28年度において開発した、mRNAを効率的に樹状細胞へ導入可能なナノ粒子を用いて、ヒト実弾がん抗原を用いたmRNAワクチンの開発をおこなった。以前より樹状細胞への遺伝子導入に用いていた、KALAペプチド修飾多機能性エンベロープ型ナノ構造体（KALA-MEND）は、リポソーム内にpDNAを内封し、その表面にαへリックス構造を有するKALAペプチドを修飾していた。しかし、本システムではヒト臨床において用いられている抗原（実弾抗原）に対する抗原特異的な免疫応答の誘導は達成できなかった。そこで、より効率的に抗原遺伝子を導入可能なmRNAの応用を試みた。その際に、KALAペプチド修飾リポソームの表面に静電的相互作用により搭載した、KALAリポプレックスを用いた。その結果、KALAリポプレックスによりmRNAを導入する事で、KALA-MENDによるpDNA導入に比べ、50倍以上遺伝子導入効率が上昇した。また、樹状細胞型mRNAワクチンに適切なアジュバントを選定するため、4種類のアジュバントを抗原mRNA搭載KALAリポプレックスにより樹状細胞へ共導入し、マウスへ免疫した際の抗原特異的CTL活性について評価した。この際、抗原として、ヒト臨床で広く用いられるNY-ESO-1を用いた。その結果、いずれのアジュバントでも有意にCTL活性が向上する処理量が存在した。そこで、NY-ESO-1発現腫瘍に対する治療的抗腫瘍効果について検証したところ、モノホスホリルリピドAの共導入が最も強力な抗腫瘍効果を示す事を明らかとした。

樹状細胞ワクチンは、抗原特異的な免疫応答に重要である「樹状細胞」を用いて、人為的に抗原特異的免疫を誘起する技術である。申請者はこれまで、樹状細胞に対し、効率的に抗原遺伝子導入・免疫活性化を可能とするDNA封入ナノ粒子の開発に成功している。平成29年度においては、平成28年度において開発した、mRNAを効率的に樹状細胞へ導入可能なナノ粒子を用いて、ヒト実弾がん抗原を用いたmRNAワクチンの開発をおこなった。以前より樹状細胞への遺伝子導入に用いていた、KALAペプチド修飾多機能性エンベロープ型ナノ構造体（KALA-MEND）は、リポソーム内にpDNAを内封し、その表面にαへリックス構造を有するKALAペプチドを修飾していた。しかし、本システムではヒト臨床において用いられている抗原（実弾抗原）に対する抗原特異的な免疫応答の誘導は達成できなかった。そこで、より効率的に抗原遺伝子を導入可能なmRNAの応用を試みた。その際に、KALAペプチド修飾リポソームの表面に静電的相互作用により搭載した、KALAリポプレックスを用いた。その結果、KALAリポプレックスによりmRNAを導入する事で、KALA-MENDによるpDNA導入に比べ、50倍以上遺伝子導入効率が上昇した。また、樹状細胞型mRNAワクチンに適切なアジュバントを選定するため、4種類のアジュバントを抗原mRNA搭載KALAリポプレックスにより樹状細胞へ共導入し、マウスへ免疫した際の抗原特異的CTL活性について評価した。この際、抗原として、ヒト臨床で広く用いられるNY-ESO-1を用いた。その結果、いずれのアジュバントでも有意にCTL活性が向上する処理量が存在した。そこで、NY-ESO-1発現腫瘍に対する治療的抗腫瘍効果について検証したところ、モノホスホリルリピドAの共導入が最も強力な抗腫瘍効果を示す事を明らかとした。