初期分泌経路オルガネラにおけるカルシウム恒常性破綻に対するストレス応答制御

控制早期分泌途径细胞器中钙稳态破坏的应激反应

• 批准号: 15J05492
• 负责人: 佐々木 桂奈江
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: University of Hyogo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J05492/
• 关键词: ゴルジ体; ストレス応答

ゴルジ体ストレス応答とは、ゴルジ体の処理能力を超える事態に対して、能力を増強することで恒常性を維持する、細胞の生命活動に必須の適応機構である。小胞体と同様にゴルジ体にも高濃度のCa2+がストックされており、Ca2+は翻訳後修飾や選別輸送など、ゴルジ体の機能に重要な役割を果たしている。そこで本研究では、ゴルジ体内のCa2+を枯渇させることにより発生したストレスに対する応答の新規経路解明を目的とし、以下の実験を行った。本研究では、ゴルジ体内のCa2+枯渇によるストレスを誘導するため、ゴルジ体に局在するCa2+ポンプSPCA1阻害剤のbis-phenolを用いた。前年度はbis-phenol処理細胞を用いて次世代シークエンサーによる網羅的遺伝子発現解析を行い、GOLGA5, KIFC3, STX11, ZFPL1の発現誘導がゴルジ体ストレス応答の新規経路によって制御される可能性を見出した。今年度は、これら４遺伝子について、転写開始点から2 kbp以内のDNA領域をレポーターのルシフェラーゼ遺伝子につなぎ、bis-phenol処理による転写活性測定を行った。GOLGA5遺伝子については、トランスフェクション方法や薬剤濃度、薬剤処理後の培養方法について条件検討を行い、bis-phenol処理による活性の上昇を確認することができ、bis-phenol処理によりGOLGA5遺伝子の転写活性領域が直接制御されることが明らかとなった。また転写開始点を+1とした場合、GOLGA5遺伝子の-1773から-951までの領域を欠失させると、bis-phenol処理による活性上昇度が大きく下がったことから、-1773~-951の領域内に転写活性の重要な領域があると考えられ、現在解析を進めている。

The ability of the cell to respond to events, to enhance its ability to maintain constancy, and to adapt to its vital activities Small cells and small cells have high Ca2 + concentrations, Ca2 + post-conversion modification and selective transport, and important functions of small cells. The purpose of this study is to clarify the new pathway of Ca2 + in the body. In this study, the bis-phenol of Ca2 +-SPCA1 inhibitor was used in the induction of Ca2 +-SPCA in vivo. In the past year, bis-phenol-treated cells were used in the analysis of gene expression in the next generation, GOLGA5, KIFC3, STX11, ZFPL1, and the possibility of new regulation of gene expression in the next generation was revealed. In this year, the DNA domain within 2 kbp from the start point of DNA writing is divided into four parts: DNA sequence, bis-phenol treatment, and DNA activity measurement. GOLGA5 gene control method, reagent concentration, culture method after reagent treatment, condition evaluation, bis-phenol treatment, activity increase confirmation, bis-phenol treatment, direct control of GOLGA5 gene activity field. When the writing start point is +1, GOLGA5 gene-1773-951

项目成果

ゴルジ体におけるカルシウム恒常性破綻に対するストレス応答制御

控制高尔基体中钙稳态破坏的应激反应

• 发表时间: 2017
• 作者: 佐々木桂奈江;谷口麻衣;若林貞夫;吉田秀郎
• 通讯作者: 吉田秀郎

MLX is a transcriptional repressor of the mammalian Golgi stress response.

MLX 是哺乳动物高尔基体应激反应的转录抑制因子。

• DOI: 10.1247/csf.16005
• 发表时间: 2016
• 期刊: Cell Structure Function
• 作者: Mai Taniguchi*;Kanae Sasaki-Osugi*;Masaya Oku;S Sawaguchi;Yumeto Kawai;Sadao Wakabayashi and Hiderou Yoshida. (*: both authors equally contributed to this work)
• 通讯作者: Sadao Wakabayashi and Hiderou Yoshida. (*: both authors equally contributed to this work)