筋肉ニッチによる造血前駆細胞制御機構の解析

肌肉生态位分析造血祖细胞控制机制

• 批准号: 15J07747
• 负责人: 田中 由香
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J07747/
• 关键词: 造血前駆細胞; 胎仔筋組織; 受容体; リガンド; 筋組織; DNAマイクロアレイ

胎生期の造血細胞は、周囲を取り囲む“ニッチ“により増殖・分化などの調整を受けるが、その制御機構の全容は未解明である。本研究では、マウス胎仔筋組織に存在する造血前駆細胞(HPC)に着目し、そのニッチ制御機構の解明を目的とした。平成28年度には、前年度に選出したHPC制御に関わる候補因子に関して、1．遺伝子・タンパク質発現解析、2．in vitro機能解析、3．候補因子を発現するニッチ細胞の解析を行った。具体的には、1．Flow cytometry法を用いて、筋組織HPCの一部が候補因子CD97・GPR97発現陽性であることを確認した。また、筋組織で高発現するリガンドのmRNA発現を測定し、Cxcl11、Cxcl12、Tnfsf9、Scfに関してマイクロアレイ解析と一致する結果を得た。2．選出した因子のうち、筋組織HPCでの受容体発現を確認したSCF・CXCL12に関して機能解析を行った。リガンド添加が細胞増殖・遺伝子発現に与える効果を評価し、2日間の培養によりSCF添加群で未添加群に比較して5.15倍の有意な生細胞数増加と、細胞増殖の指標c-Myc・Ccnd1の発現上昇を確認した。また造血関連転写因子に関して、SCF添加群におけるGata2の発現減少、及びMecom、Runx1、Foxo3の発現増加を認めた。CXCL12添加条件では細胞数・遺伝子発現の変動がみられなかった。3．筋組織中でリガンドを発現する細胞分画を検索したところ、非造血系細胞(血管内皮細胞、筋細胞、いずれにも分類されない細胞)がScf・Cxcl12を高発現しており、これらの細胞が筋組織HPCの増殖・分化を調整するニッチとして機能する可能性が示唆された。全体として、筋組織HPCの制御因子の候補を同定し、ニッチとして機能しうる細胞集団を明らかにすることで、筋組織HPCのニッチ制御機構解明に寄与する成果を挙げた。

During the prenatal period, the hematopoietic cells were collected from the fetal stage, the peripheral blood cells were collected, and the differentiation and differentiation of the hematopoietic cells were collected in the fetal stage. In this study, there are prehematopoietic progenitor cells (HPC) in the tissue of fetal tendon in this study. The purpose of this study is to understand the purpose of this study. In the year 28 of Pingcheng and the previous year, the HPC system has been selected to analyze the health factors, 1. The sub-system has been analyzed, the 2.in vitro has been analyzed, and 3. The waiting factor has been analyzed. Specific information and 1.Flow cytometry methods are used to organize HPC. A waiting factor, CD97 ·GPR97, is used to confirm the waiting factor. The results of mRNA measurement, Cxcl11, Cxcl12, Tnfsf9, and Scf tissue analysis are consistent with each other. 2. Select the key factor and tissue HPC recipient to confirm that the SCF ·CXCL12 device is capable of parsing bank data. The number of SCF cells that were not added within 2 days was 5.15 times higher than that of the population that was 5.15 times higher than that of the population. The index of cell colonization is c-Myc. Ccnd1 cells are now confirmed. The hematopoietic factors, SCF, Gata2, and Mecom, Runx1, Foxo3 were less than that of normal controls. CXCL12 adds a conditional cell count child to realize that you are not allowed to do so. 3. In the tendon tissue, the cells were divided into three groups: cord cells, non-hematopoietic cells (vascular endothelial cells, tendon cells, Scf Cxcl12 cells). The possibility of cell differentiation, differentiation All the tissue HPC control factors are the same as those of the system, and the data collection shows that the system of the HPC system is the same, and the organization of the system is responsible for the results of the system.

项目成果

Exo-utero surgical technique enables us to investigate hematopoietic homing from fetal liver to bone marrow.

宫外手术技术使我们能够研究从胎儿肝脏到骨髓的造血归巢。

• 发表时间: 2015
• 作者: Tanaka Y;Inoue T;Kulkeaw K;Yanagi C;Tan KS;Kojima N;Swain A;Shirasawa S;Nakanishi Y; Sugiyama D.
• 通讯作者: Sugiyama D.

Paracrine effects of CCL17 and CCL22 regulate hematopoietic stem cell migration in mouse fetal liver.

CCL17 和 CCL22 的旁分泌作用调节小鼠胎儿肝脏中的造血干细胞迁移。

• 发表时间: 2016
• 作者: Tanaka Y;Ssasaki T;Kulkeaw K;Tan KS;Yumine A;Swain A;Kojima N;Madtookung M;Munir H;Nakanishi Y;Sugiyama D.
• 通讯作者: Sugiyama D.

Embryonic intra-aortic clusters undergo myeloid differentiation mediated by mesonephros-derived CSF1 in mouse.

小鼠胚胎主动脉内簇经历由中肾衍生的 CSF1 介导的骨髓分化。

• DOI: 10.1007/s12015-016-9668-2
• 发表时间: 2016
• 期刊: Stem Cell Reviews
• 作者: Sasaki T;Tanaka Y;Kulkeaw K;Yumine-Takai A;Tan KS;Nishinakamura R;Ishida J; Fukamizu A;Sugiyama D.
• 通讯作者: Sugiyama D.

Exo-utero surgical technique enables investigation of hematopoietic homing during embryogenesis.

宫外手术技术能够研究胚胎发生过程中的造血归巢。

• 发表时间: 2015
• 作者: Tanaka Y;Inoue T;Kulkeaw K;Tan KS;Kojima N;Swain A;Shirasawa S;Nakanishi Y;Sugiyama D.
• 通讯作者: Sugiyama D.

Plasma microRNA-451 as a novel hemolytic marker for β0-thalassemia/HbE disease.

• DOI: 10.3892/mmr.2017.6326
• 发表时间: 2017-05
• 期刊: Molecular medicine reports
• 影响因子: 3.4
• 作者: Leecharoenkiat K;Tanaka Y;Harada Y;Chaichompoo P;Sarakul O;Abe Y;Smith DR;Fucharoen S;Svasti S;Umemura T
• 通讯作者: Umemura T