权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

オートファジーと上皮細胞極性形成の連関による腸管恒常性維持機構の解明

通过自噬与上皮细胞极性形成之间的联系阐明肠道稳态维持机制

基本信息

批准号：
16J02727
负责人：
長井広樹
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J02727/
关键词：
オートファジー Ref(2)P/p62 3細胞結合部位 ROS 腸内常在菌腸管恒常性腸内細菌

项目摘要

細胞内のタンパク質複合体などを分解するオートファジーの機能不全は、腸内細菌とともに炎症性腸疾患の発症リスクとなるが、そのメカニズムは不明である。本研究ではショウジョウバエをモデル生物に用い、オートファジー不全が起きた腸管上皮細胞ではRef(2)Pタンパク質（哺乳類p62）が蓄積し、それらが腸内常在菌依存的な活性酸素種（ROS）の刺激に応じて多量体を形成することこそが、腸管上皮の恒常性を破綻させる原因であることを明らかにしてきた。今年度は、ROS刺激に応じてRef(2)Pの多量体形成が起こるメカニズムに関する解析を行った。その結果、①ROSの1種であるH2O2をショウジョウバエ個体に経口摂取させた際に、Ref(2)Pの多量体が腸管上皮細胞の3細胞結合部位近傍に局在していることを見出した。また、3細胞結合部位の構成因子の発現を抑制すると、オートファジー不全腸管上皮細胞におけるRef(2)P多量体形成がキャンセルされた。これらの結果から、3細胞結合部位がROS刺激に応じたRef(2)P多量体形成の場であることが示唆された。続いて、②Ref(2)P多量体が3細胞結合部位のような特殊な場に局在するメカニズムに迫るため、前年度より実施していたオートファジー不全個体のH2O2摂取時の生存率低下に関与する遺伝子の網羅的スクリーニングを進めた。スクリーニングの結果、31遺伝子を同定し、そのうちの13遺伝子が、ROS刺激依存的なRef(2)P多量体の形成や局在に影響を与えた。それらの遺伝子には膜貫通タンパク質も含まれており、細胞外から与えられるROS刺激を感知しRef(2)P多量体形成を誘導する因子である可能性が考えられる。今後、同定した遺伝子とオートファジーやRef(2)Pの関係を解析することで、オートファジー不全腸管で炎症が生じる分子メカニズムを明らかにできると期待される。

Insufficiency of intracellular protein complexes, intestinal bacteria, and inflammatory bowel disease In this study, we investigated the reasons for the accumulation of Ref.(2)P protein (mammalian p62) in intestinal epithelial cells, the formation of multiple quantities due to stimulation of reactive acid species (ROS), which are often dependent on intestinal bacteria, and the lack of homeostasis in intestinal epithelial cells. This year, ROS stimulated the formation of Ref.(2)P polysomes, and the analysis of these polysomes was carried out. The results showed that: (1) H2O2 was detected in one species of ROS, and the amount of Ref(2)P was detected near the binding site of three cells in intestinal epithelial cells. Ref.(2) P-polysomy formation in incomplete intestinal epithelial cells was inhibited by inhibition of the expression of constitutive factors at 3-cell binding sites. The results showed that the binding sites of 3 cells were stimulated by ROS, and the fields of polysomy formation were indicated by Ref(2). In addition, ②Ref(2)P polysomes are forced by the special field of the three-cell binding site in the Suurukungu area. In the previous year, the implementation of the program has been carried out to improve the survival rate of incomplete individuals due to the low H2O2 "timing" and related to the spread of genetic viruses. The results of the test, 31 genes, 13 genes, ROS stimulus-dependent Ref(2)P polysome formation, and the effects of the test. The possibility of factors inducing the formation of P polysomes is examined. In the future, the relationship between the two factors will be analyzed.