ヒト動脈硬化組織検体におけるＣｈｋ２－ｐ５３シグナルの解析

人动脉粥样硬化组织标本中 Chk2-p53 信号的分析

• 批准号: 16J04588
• 负责人: 藤本 真徳
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J04588/
• 关键词: p53; IL33; NAFLD; LS-MS/MS; Chk2リン酸化

癌細胞を用いて、Myc-FLAG-Chk2発現vectorを腫瘍細胞に導入し、Chk2特異的結合分子を同定した。LC-MS/MS解析により新規リン酸化部位を同定した。Chk2キナーゼドメインの中心に、新規リン酸化部位T441/S442を認め、その周囲のリジン残基はユビキチン化されていた。次に、Chk2-516A/518A(非リン酸化)変異体のDNA損傷におけるG1期細胞周期制御への影響をFUCCI systemを用いて検討した。P53をH1299にAdenovirusを用いて導入し、またChk2 wild typeとChk2 516/518A変異体を導入した。すると、G1 phaseにある細胞でp21のmRNA発現が低下することがqPCRで確認された。以上から、Chk2-516/518がDNA損傷におけるG1期細胞周期制御に役割を果たすことが明らかとなった。２．NAFLD/NASH(non-alcoholic fatty liver disease / non-alcoholic steatohepatitis)は近年注目を集めている。肝臓には多数の免疫細胞が常在し、炎症がNAFLD/NASH病態進展に寄与する。IL33を投与したマウスでは空腹時血糖は低下した。pyruvate tolerance testによる糖新生を誘導した際、rIL33投与群では血糖上昇すなわち糖新生が有意に抑制されることが明らかとなった。この現象は、新規免疫細胞ILC2を含む免疫細胞を欠損したNSG mouseでは消失した。次にILC2を肝臓からsortし、ILC2ノックアウトマウスに移植したところ、IL33に対する反応性がrescueされた。この反応はIL13 KOマウスでは消失した。以上から、肝臓ILC2由来のIL13が糖新生抑制による血糖低下を担う可能性が示唆された。（近日論文投稿予定）

Cancer cells are introduced using Myc-FLAG-Chk2 expression vector and tumor cells, and Chk2-specific binding molecules are determined together. LC-MS/MS analysis of the acidified part of によりリンを同定した. Chk2 キナーゼドメインの中に, new regulation リン acidified part T441/ S442をcognition, そのweek囲のリジン residue はユビキチン化されていた. Chk2-516A/518A (non-nanolylated) allogeneic DNA damage is used to control the G1 phase cell cycle and affect the FUCCI system. P53 H1299 Adenovirus has been imported into the virus, and Chk2 wild type Chk2 516/518A has been introduced into the virus.すると、G1 phase にある cells でp21のmRNA expression is low and qPCR でconfirmation された. Above, Chk2-516/518 and DNA damage are the result of G1 phase cell cycle control and the results are clear. 2． NAFLD/NASH (non-alcoholic fatty liver disease / non-alcoholic steatohepatitis) has attracted much attention in recent years. The majority of immune cells are present in the liver, and inflammation is responsible for the progression of NAFLD/NASH pathology. The administration of IL33 can reduce blood sugar levels during fasting. The pyruvate tolerance test showed that the glucose regeneration was induced and the rIL33 administration group showed that the blood sugar increased and the glucose regeneration was intentionally inhibited and the glucose regeneration was inhibited and the results were clear. As a result, the new immune cell ILC2-containing immune cells are damaged, and the NSG mouse disappears. Secondary ILC2 liver transplantation, ILC2 liver transplantation, IL33 reaction resistance, rescue.この濜はIL13 KOマウスではdisappearした. As mentioned above, IL13, which is the origin of hepatic ILC2, and the inhibition of glycogenogenesis are also indicative of the possibility of hypoglycemia. (Thesis submission will be finalized in the near future)

项目成果

RNA-seq解析による褐色細胞腫(Pheo)の悪性/転移性規定因子の探索

通过 RNA-seq 分析寻找嗜铬细胞瘤 (Pheo) 的恶性/转移决定因素

• 发表时间: 2016
• 作者: 藤本真徳;滝口朋子;永野秀和;佐久間一基;中山哲俊;田村愛;駒井絵里;志賀明菜;河野貴史;樋口誠一郎;鈴木佐和子;小出尚史;木村伯子;横手幸太郎;田中知明
• 通讯作者: 田中知明

褐色細胞腫の臨床的特徴と各種遺伝子発現の関連における解析

嗜铬细胞瘤临床特征与各种基因表达的关系分析

• 发表时间: 2016
• 作者: 藤本真徳;滝口朋子;佐久間一基;中山哲俊;駒井絵里;志賀明菜;河野貴史;樋口誠一郎永野秀和;橋本直子;鈴木佐和子;小出尚史;吉田知彦;田中知明;横手幸太郎
• 通讯作者: 横手幸太郎

Multi-azole resistant Aspergillus fumigatus harboring Cyp51A TR46/Y121F/T289A isolated in Japan

• DOI: 10.1016/j.jiac.2016.01.015
• 发表时间: 2016-07-01
• 期刊: JOURNAL OF INFECTION AND CHEMOTHERAPY
• 影响因子: 2.2
• 作者: Hagiwara, Daisuke;Takahashi, Hiroki;Kamei, Katsuhiko
• 通讯作者: Kamei, Katsuhiko

Manifestations of Systemic Lupus Erythematosus in Female Patients with Polysomy X: The possible role of chromosome X.

X 型多体性女性患者系统性红斑狼疮的表现：X 染色体的可能作用。

• 发表时间: 2016
• 期刊: Modern Rheumatology.
• 作者: Taro Iwamoto*;Masanori Fujimoto*;Kei Ikeda;Aiko Saku;Sohei Makita;Shunsuke Furuta;Timothy B Niewold;Hiroshi Nakajima.
• 通讯作者: Hiroshi Nakajima.

リキシセナチドの2型糖尿病における治療効果の検討

利西拉来治疗2型糖尿病的疗效观察

• 发表时间: 2016
• 作者: 藤本 真徳 ;河野 貴史;永野 秀和;田村 愛 ;滝口 朋子;内田 大学 中村 晋;佐久間一基;樋口誠一郎;鈴木佐和子;吉田 知彦;小出 尚史; 橋本 直子;志賀 明菜;駒井 絵里;田中 知明;横手幸太郎
• 通讯作者: 横手幸太郎