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ダイズ種子貯蔵タンパク質の構造形成にかかわるフォールディング酵素の機能解明

阐明参与大豆种子储存蛋白结构形成的折叠酶的功能

基本信息

批准号：
16J05933
负责人：
奥田綾
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、ダイズ種子貯蔵タンパク質の立体構造形成メカニズムの解明を目的とし、小胞体におけるタンパク質の酸化的フォールディングを担う酵素、ダイズPDIファミリータンパク質の機能解明を行う。さらに、PDIを活性化する酸化酵素GmERO1についても研究を行い、ダイズの小胞体におけるタンパク質の酸化的フォールディングについて網羅的な解析を進める。本年度は以下に記す二つの研究成果を上げた。(1)ダイズPDIファミリーとGmERO1の量的バランスによる酸化的フォールディングの制御生体内におけるダイズPDIファミリーおよびGmERO1の存在量を半定量ウエスタンブロット分析により調べるとともに、複数のダイズPDIファミリーとGmERO1を組み合わせた活性測定を行った。その結果、生体内ではGmERO1や酸化が得意なダイズPDIファミリーの濃度は低く抑えられており、小胞体内でのタンパク質の酸化的フォールディングに適した比率となっていることが示唆された。これによりダイズPDIファミリーとGmERO1は機能と役割によって存在濃度が異なり、その量的バランスが小胞体におけるタンパク質の酸化的フォールディングを調節、制御しているという新たな概念を提唱するに至った。(2) GmPDIL6およびGmPDIMのNADPH依存的なグルタチオン還元活性GmPDIMおよび機能未知であった自身が同定したGmPDIL6について、NADPH依存的なグルタチオン還元活性があることを見出した。小胞体におけるグルタチオンホメオスタシスに寄与する新たなグルタチオン還元経路の存在を示唆する重要な発見である。タンパク質の酸化的フォールディングを担うPDIファミリーが、同時に小胞体のレドックス環境を調節している可能性が示唆され、小胞体内におけるタンパク質フォールディングとレドックス環境の制御との密接な関係を示すこととなった。

In this study, the three dimensional structure of seed storage system was studied. The purpose of the study was to understand the function of the three dimensional structure of seed storage system. The function of the three dimensional structure of seed storage system was studied. In addition, PDI activation of the enzyme GmERO1 in the study of small cells in the process of analysis of the enzyme network This year's research results are listed below. (1)The amount of GmERO 1 in the body was determined by semi-quantitative analysis. In vivo, GmERO 1 was found to be acidic, and the concentration of GmERO 1 was found to be low. In vivo, GmERO 1 was found to be acidic, and the concentration of GmERO 1 was found to be low. In addition, GmERO 1 has a variety of functions and functions, such as regulating, controlling and promoting the concept of new products in the presence of different concentrations and quantities of small cells. (2)GmPDIL 6 and GmPDIM NADPH-dependent reductive activity GmPDIM function unknown, self-identity GmPDIL 6 and NADPH-dependent reductive activity Small cells are important for the development of new cell pathways. The possibility of regulating the environment of the cell is indicated by the PDI and the close relationship between the control of the environment and the quality of the cell.