Ａ型インフルエンザウイルスＰＡ－ＸのｍＲＮＡ分解機構の解明

A型インフルエンザウイルス蛋白質PA-XはmRNAを分解することで蛋白質の発現を抑制するshutoff活性をもつ。しかしながら、PA-Xがどのような機序でmRNAを分解しているのかは明らかになっていない。そこで、PA-Xによるshutoff機構を解明し、インフルエンザウイルスにおけるPA-Xの重要性を明らかにすることを目的とし、研究を行った。酵母を用いたスクリーニングによりPA-Xのshutoff活性に重要な遺伝子としてN末端アセチル化酵素NatBの構成蛋白質であるNat3とMdm20を同定した。NatBがヒト細胞でのPA-Xの活性に重要かどうか調べるため、Nat3、Mdm20のヒトホモログ遺伝子であるNAA20、NAA25をノックアウト（KO）したヒト細胞株を樹立し、これらの細胞株におけるPA-Xの活性を調べた。するとNAA20やNAA25をKOした細胞株におけるPA-Xの活性は野生型細胞株における活性と比べ著しく低いことがわかった。NatBはM-E、M-DまたはM-Nから始まる蛋白質のN末端をアセチル化する。PA-XはM-EというN末端配列をもち、これまでの結果からNatB認識配列をもつときPA-Xは高い活性を示し、またヒト細胞で発現させたPA-XのN末端はアセチル化されていることがわかっている。PA-XのN末端アセチル化にNatBが重要かどうか調べるため、NAA20やNAA25をKOした細胞でPA-Xを発現させ解析すると、野生型細胞で発現させたときと比べ、KO細胞で発現させたときPA-XのN末端がアセチル化されている割合が低下していた。これにより、ヒト細胞におけるPA-Xのshutoff活性およびN末端アセチル化にNatBが重要であることがわかった。これまでに得られた結果から、PA-Xのshutoff活性にはNatBによるN末端アセチル化が重要であることがわかった。

A型インフルエンザウイルス蛋白質PA-XはmRNAを分解することで蛋白質の発現を抑制するshutoff活性をもつ。しかしながら、PA-Xがどのような機序でmRNAを分解しているのかは明らかになっていない。そこで、PA-Xによるshutoff機構を解明し、インフルエンザウイルスにおけるPA-Xの重要性を明らかにすることを目的とし、研究を行った。酵母を用いたスクリーニングによりPA-Xのshutoff活性に重要な遺伝子としてN末端アセチル化酵素NatBの構成蛋白質であるNat3とMdm20を同定した。NatBがヒト細胞でのPA-Xの活性に重要かどうか調べるため、Nat3、Mdm20のヒトホモログ遺伝子であるNAA20、NAA25をノックアウト（KO）したヒト細胞株を樹立し、これらの細胞株におけるPA-Xの活性を調べた。するとNAA20やNAA25をKOした細胞株におけるPA-Xの活性は野生型細胞株における活性と比べ著しく低いことがわかった。NatBはM-E、M-DまたはM-Nから始まる蛋白質のN末端をアセチル化する。PA-XはM-EというN末端配列をもち、これまでの結果からNatB認識配列をもつときPA-Xは高い活性を示し、またヒト細胞で発現させたPA-XのN末端はアセチル化されていることがわかっている。PA-XのN末端アセチル化にNatBが重要かどうか調べるため、NAA20やNAA25をKOした細胞でPA-Xを発現させ解析すると、野生型細胞で発現させたときと比べ、KO細胞で発現させたときPA-XのN末端がアセチル化されている割合が低下していた。これにより、ヒト細胞におけるPA-Xのshutoff活性およびN末端アセチル化にNatBが重要であることがわかった。これまでに得られた結果から、PA-Xのshutoff活性にはNatBによるN末端アセチル化が重要であることがわかった。