卵巣癌転移に関わる免疫機構の解明

阐明卵巢癌转移中涉及的免疫机制

基本信息

批准号：
16J07245
负责人：
植野さやか
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-04-22 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J07245/
关键词：
腹腔内播種免疫抑制卵巣癌転移免疫回避癌幹細胞

项目摘要

昨年度の研究結果から、卵巣癌幹細胞はEpCAMの発現によって放出された液性因子によりマクロファージを誘引し、免疫機構の制御及び腹腔内播種を引き起こすことが示唆された。今年度はさらに癌幹細胞だけでなく、卵巣癌細胞全体を対象に免疫回避機構を解析することとした。マウス卵巣癌細胞株をマウス腹腔内移植を繰り返して高転移株を作成した。次に、高転移株と親株の遺伝子発現をマイクロアレイにて比較し、転移に関わる候補遺伝子を抽出した。さらに、公共データベースを用いて卵巣癌患者予後に寄与する候補遺伝子を絞り込み、SERPINF1（タンパク：PEDF）を同定した。PEDFは他の癌種においては、血管新生抑制機能を介して癌抑制遺伝子として作用することが知られているが、卵巣癌における機能は明らかになっていない。今回の検討では、PEDFは高転移株で発現が増強しており、ヒトデータベースの解析においても、発現の高い群で予後不良であるとの結果であった。そこでPEDFが実際に転移に寄与しているかどうかを調べることとした。まず、PEDFを親株細胞に強制発現させると、腹腔内転移が増加した。親株細胞の中にはPEDFの発現の異なる多数のクローンが含まれており、PEDF発現強度に応じて腹腔内転移能が増加した。また、PEDFの発現は足場の有無に関わらず、増殖に影響を及ぼさない一方、がん細胞の腹腔内での生存期間に影響を与えた。腹腔内の免疫細胞解析では、IL10を産生するCD206+マクロファージが増加しており、腹腔内IL10濃度自体も有意に増加することを見出した。これらの結果より、卵巣癌細胞から放出されるPEDFは腹腔内免疫細胞を抑制し、癌細胞の生存ひいては腹腔内転移能の獲得に寄与していることが示唆された。

去年的研究结果表明，卵巢癌干细胞通过Epcam表达释放的体液因子吸引巨噬细胞，从而导致免疫机制和腹膜内传播。今年，我们决定进一步分析癌症干细胞的免疫逃避机制，而且还在所有卵巢癌细胞上。通过对小鼠卵巢癌细胞系的重复腹膜内移植产生高度转移性菌株。接下来，使用微阵列比较了高度转移性菌株和父菌株的基因表达，并提取了参与转移的候选基因。此外，使用公共数据库鉴定SERPINF1（蛋白质：PEDF），对卵巢癌患者预后的候选基因进行了缩小。 PEDF通过其在其他癌症物种中的血管生成抑制作用作用可作为肿瘤抑制基因，但尚未阐明其在卵巢癌中的功能。在这项研究中，PEDF的表达在高度转移性菌株中得到了增强，在人类数据库分析中，结果表明，高表达的组预后较差。因此，我们决定调查PEDF是否真正促进了转移。首先，PEDF在母细胞系上的强迫表达增加了腹膜内转移。在亲本细胞中，包括许多具有不同表达PEDF的克隆，并且根据PEDF表达的强度，腹膜内转移能力提高。此外，无论存在脚手架，PEDF表达都不会影响增殖，而是影响癌细胞腹膜内生存的。腹膜内免疫细胞分析发现，产生IL10的CD206+巨噬细胞的数量增加了，并且腹膜内IL10浓度本身也显着增加。这些结果表明，从卵巢癌细胞释放的PEDF抑制腹膜内免疫细胞，有助于癌细胞的存活，从而获得腹膜内转移的潜力。