腱由来新奇生理活性因子の機能解明と応用

肌腱新型生理活性因子的功能阐明及应用

基本信息

项目摘要

本研究課題では、筋細胞や骨細胞の増殖・分化に寄与する腱由来の生理活性因子の機能評価とその因子の同定を目指した。申請者は本研究課題においてこれまで腱細胞は筋芽細胞と共培養することにより、腱由来生理活性因子が筋芽細胞を増殖させること、筋芽細胞の成熟度合 (分化能) を促進させることを明らかにしてきた。最終年度である本年では、これらの現象がヒトの細胞を用いた際にも認められるか否かを検証することを目標とした。そこで申請者は、コペンハーゲン大学ビスペビアウ病院協力のもと、ヒトの筋細胞および腱細胞を単離し用いることとした。筋および腱組織は前十字靭帯損傷患者から採取し、これらの組織を用いて細胞を単離した。現在はヒト筋細胞と腱細胞にこれら以外の細胞が混ざっていないかの確認 (精製) を免疫染色法にて行っている段階である。今後は、マウスを用いた際に得られた結果との再現性を免疫染色法にて確認し、プロテオーム解析法にて筋分化制御を促進させる腱由来因子を同定する。そして、同定した因子の中で上位候補に挙げられた因子に着目し、これらの因子が筋分化制御に寄与するかをリコンビナントたんぱく質および関連阻害剤を用いて検証する。本研究課題で得られた成果を足掛かりとして研究を発展させる予定である。
This study aims to evaluate the function of physiological active factors and identify the identity of factors related to the proliferation and differentiation of tendon cells and osteocytes. The applicant is interested in co-culture of tendon cells and tendon bud cells. The growth of tendon bud cells is promoted by tendon-derived physiologically active factors. The maturity and differentiation of tendon bud cells are promoted. The final year is the year when the phenomenon is recognized. The applicant shall submit the application to the University for approval. Tendon tissue was removed from the anterior cruciate ligament of the patient. Now the tendon cells and tendon cells are mixed and confirmed (refined) by immunostaining. In the future, the results obtained by immunostaining and the reproducibility of tendon differentiation factors were identified. In addition, in the middle of the constant factor, the upper candidate factor is selected, and in the middle of the constant factor, the upper candidate factor is selected. The results of this research project are sufficient for the development of this research project.

项目成果

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