新規ゲノム編集技術の開発と生体内遺伝子修復治療への応用

新型基因组编辑技术的开发及其在体内基因修复治疗中的应用

• 批准号: 15K21762
• 负责人: 鈴木 啓一郎
• 金额: $ 36.61万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Home-Returning Researcher Development Research)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15K21762/
• 关键词: ゲノム編集; HITI; 遺伝子治療; 遺伝子工学; 細胞工学

近年、ゲノムの標的遺伝子を操作する『ゲノム編集』技術が急速に進歩し、培養細胞のゲノム塩基配列を選択的に改変することが可能となった。しかし、生体内で直接ゲノム配列を改変する事は非常に困難である。申請者は最新の研究成果として、生きたマウスの脳・筋肉にて標的配列を自由に改変する世界初の革新的な技術「HITI」の開発に成功している(Suzuki et al, Nature 2016)。本研究課題では、研究代表者らが開発したゲノム編集技術「HITI」を発展させ、生体内の随意の組織・器官内で特定の細胞のゲノム情報を自由自在に改変する、次世代ゲノム編集技術の確立を目指す。更に当該技術を発展させることで、難治性遺伝病の治療を目的とした『生体内遺伝子修復治療法』の開発を目指す。特に平成29年度は、『マウス生体内の随意の組織・器官に遺伝子ノックインを行うための新ゲノム編集技術の開発』に関する研究を行なった。研究代表者らが開発した、生体内での遺伝子ノックイン効率が3%程度と低いことが生体内ゲノムの改変に対して大きな問題点であった。この問題点を解決するために、様々な方法を検討した結果、感染するAAVベクターのタイターを上げる事で、従来では3-10%であった遺伝子ノックイン効率が15-25%まで上昇し、更なる高効率化に成功し、年度目標を達成した。今後は『遺伝性疾患の原因遺伝子を疾病罹患部位特異的に修復する生体内遺伝子修復治療法の開発』に注力する。さらに安全性の検討を新たに行なうことで、安全かつ高効率な生体内遺伝子修復治療法の確立を目指す。

In recent years, the technology behind the operation of the ゲノムの名の子をする『ゲノムCompilation』 has been rapidly progressing.し、Cultivated cells' のゲノム塩塩选択's にchange変することがpossibleとなった. It is very difficult to change things directly within the body. The applicant's latest research results are the latest research results, raw materials, and the standard arrangement of muscles and muscles is free and the world's first innovative technology "HITI" has been successfully developed (Suzuki et al, Nature 2016). The subject of this research, the representative of the research, Hikari Kaikai, compiles the technology "HITI", and the group in charge of living in vivo The information on specific cells in tissues and organs can be freely modified and the next-generation editing technology has been established. The current development of this technology and the purpose of treatment of refractory residual disease are the development of "In vivo residual residual repair treatment method". Special にHeisei 29は、『マウス生的故事的 tissue and organ に缝子ノックインを行うための新ゲノムCompilation technology の开発　に关する Research を行なった. Research representative: らが开発した, in vivo での缝子ノックインefficiency 3% process The degree is low and the problem is the big problem in the body.このproblem solutionするために、様々なmethodを検questionしたresult、infectionするAAVベクターのタイターを上げる事で、従来ではThe efficiency has increased from 3-10% to 15-25%, the efficiency has been improved successfully, and the annual target has been achieved. From now on, we will pay attention to the development of "repair and treatment methods for the repair of inherited diseases in the body that are specific to the site where the disease occurs." It is a safe and efficient method of repairing and repairing the internal organs of the body.

项目成果

In vivo genome editing via CRISPR/Cas9 mediated homology-independent targeted integration.

通过 CRISPR/Cas9 介导的同源独立靶向整合进行体内基因组编辑

• DOI: 10.1038/nature20565
• 发表时间: 2016-12-01
• 期刊: Nature
• 影响因子: 64.8
• 作者: Suzuki K;Tsunekawa Y;Hernandez-Benitez R;Wu J;Zhu J;Kim EJ;Hatanaka F;Yamamoto M;Araoka T;Li Z;Kurita M;Hishida T;Li M;Aizawa E;Guo S;Chen S;Goebl A;Soligalla RD;Qu J;Jiang T;Fu X;Jafari M;Esteban CR;Berggren WT;Lajara J;Nuñez-Delicado E;Guillen P;Campistol JM;Matsuzaki F;Liu GH;Magistretti P;Zhang K;Callaway EM;Zhang K;Belmonte JC
• 通讯作者: Belmonte JC

The latest developments in genome editing technologies

基因组编辑技术的最新进展

• 发表时间: 2017
• 作者: Keiichiro Suzuki and Juan Carlos Izpisua Belmonte;鈴木 啓一郎;Keiichiro Suzuki;Keiichiro Suzuki
• 通讯作者: Keiichiro Suzuki

In vivo genome editing via CRISPR-Cas9 mediated homology-independent targeted integration(HITI)

通过 CRISPR-Cas9 介导的同源独立靶向整合（HITI）进行体内基因组编辑

• 发表时间: 2017
• 作者: Keiichiro Suzuki and Juan Carlos Izpisua Belmonte;鈴木 啓一郎;Keiichiro Suzuki
• 通讯作者: Keiichiro Suzuki

Mitochondrial and Nuclear Genome Editing in Zygotes

受精卵中的线粒体和核基因组编辑

• 发表时间: 2017
• 作者: Keiichiro Suzuki;Yuji Tsunekawa;Reyna Hernandez-Benitez;Jun Wu;Mako Yamamoto;Fumio Matsuzaki and Juan Carlos Izpisua Belmonte;Keiichiro Suzuki;Keiichiro Suzuki
• 通讯作者: Keiichiro Suzuki

Salk Institute for Biological Studies/University of California San Diego(米国)

索尔克生物研究所/加州大学圣地亚哥分校（美国）