Fluoreszenzlebensdauer-Manipulation in den autofluoreszierenden Proteinen: Entwicklungsstrategie für neue Anwendungen

自发荧光蛋白的荧光寿命操纵：新应用的开发策略

• 批准号: 5452171
• 负责人: Professor Dr. Gregor Jung
• 金额: --
• 依托单位: Professur für Biophysikalische Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2004-12-31 至 2010-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5452171?language=en
• 关键词: Fluoreszenzlebensdauer; Manipulation; den; autofluoreszierenden; Proteinen

Dieses Projekt behandelt das Design autofluoreszierender Proteine, deren Fluoreszenzlebensdauer gezielt durch Mutagenese modifiziert wird. Der erste Teil beinhaltet die de-novo Entwicklung eines Fluoreszenzindikators für das Lifetime-Imaging (FLIM) zum Ziel. Es soll ein redoxsensitives Grün Fluoreszierendes Protein (GFP) etabliert werden, das das Redoxpotenzial eines markierten Organismus über die Fluoreszenzlebensdauer auszulesen gestattet. Die Reduktion einer Disulfid-Brücke im Proteingerüst zu einer Dithiolfunktion erhöht die lokale Flexibilität des Chromophors und begünstigt damit strahlungslose Kanäle aus dem angeregten Zustand. Die gemittelte Fluoreszenzlebensdauer ist so ein Maß für das Verhältnis von reduziertem zu oxidiertem Protein. Im zweiten Teil soll ein Markerprotein, welches für die räumlich hochauflösende STED-Mikroskopie verwendet werden kann, am Ende der Entwicklung stehen. Hier wird ein Blau Fluoreszierendes Protein (BFP) mit optimierten Eigenschaften entwickelt, wobei sich die Verbesserung auf eine Verlängerung der Fluoreszenzlebensdauer, eine gesteigerte Photostabilität und die An- und Abregbarkeit mit vergleichsweise billigen, gepulsten Diodenlasern beziehen. Der Erfolg im Laufe der Proteinentwicklung wird jeweils an einem eigens dafür gebauten Experiment überprüft. Durch diese Rückkopplung wird eine effiziente Entwicklung der Proteine gewährleistet. Getestet wird die Apparatur mit dem Gold Fluoreszierenden Protein (GdFP), das für beide Applikationen geeignet erscheint.

设计自荧光增效蛋白，又称荧光增效蛋白，是一种诱变修饰蛋白。本研究采用荧光指示剂研究<s:1>生命成像（FLIM）技术。荧光蛋白（GFP）是一种氧化致敏的颗粒状荧光蛋白（GFP），是一种氧化致敏的蛋白质。Die reduction einer diulfidi - brcke im proteinger<e:1> st zu einer dithiolfunkfunction erhöht Die lokale Flexibilität des Chromophors und begnstit damit strahlungslose Kanäle aus dem angeregten Zustand。Die gemittelte Fluoreszenzlebensdauer ist so in masß f<e:1> r das Verhältnis von reduziertem zu oxidertem蛋白。研究：1 .基因标记蛋白；2 .基因标记蛋白；3 .基因标记蛋白；3 .基因标记蛋白；研究结果表明，蓝光荧光蛋白（BFP）是一种新型的荧光蛋白，其结构为：1 .荧光蛋白的结构为：1 .荧光蛋白的结构为：1 .荧光蛋白的结构为：1 .荧光蛋白的结构为：1 .荧光蛋白的结构为：1 .荧光蛋白的结构为：1 .荧光蛋白的结构；生物力学与生物力学研究[j] . <s:1>生物力学实验<e:1> [j]。荷兰疾病<s:1> ckkopplung - e - effizente Entwicklung der protein gewährleistet。金荧光蛋白（golden Fluoreszierenden Protein, GdFP），德国应用化学研究所（applied kationen）。