性腺刺激ホルモン放出ホルモンのパルス状分泌制御メカニズムの解明

阐明控制促性腺激素释放激素脉冲式分泌的机制

• 批准号: 17J09591
• 负责人: 高橋 宙大
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J09591/
• 关键词: kappa opioid receptor; KOR発現ニューロンの役割

遺伝子改変ラットの解析に取り組み、継続的に使用している系統に加え新たに作出した系統の確立を試みた。まず、マイクロインジェクションによる遺伝子導入が成功しているかをPCR法および免疫染色法により確認した。遺伝子導入の成功が確認できた系統に関してはさらなる解析を行った。同時に、本研究を進めていく上で有用と思われる系統に関しては繰り返し交配を行い、系統維持・個体数増加に努めた。確立に成功した複数系統を用い、kappa-opioid receptor (KOR)発現細胞の同定を目的として、遺伝子改変ラットにおいてKORプロモーター下で発現するVenus陽性細胞を指標とし、目的遺伝子・関連遺伝子のmRNA や目的タンパク質との共染色を行った。その結果、KOR発現細胞がKNDyニューロンとは異なるニューロンでありGABAまたはグルタミン酸分泌を介してGnRHパルスの制御に関与していることが示唆された。また、Venus陽性細胞をピックアップし次世代シーケンサーを用いてKOR発現細胞に発現する遺伝子群を明らかにするため、本研究室において細胞ピックアップの実験系を確立した。本研究で確立した複数系統の遺伝子解変ラットのVenus陽性細胞のピックアップを行った結果、先行研究やこれまでの本研究との関連が示唆される結果も得られた。統計的解析は行えてはいないものの、KOR発現細胞の同定のために極めて重要な結果だと思われる。

The analysis of the change in the number of components, the use of the system, the addition of new components and the establishment of the system The successful introduction of the gene was confirmed by PCR and immunostaining. The successful introduction of the virus confirms that the system is ready for analysis. At the same time, this study has been carried out in the past, and the number of individuals has increased. To establish the successful use of multiple system, kappa-opioid receptor (KOR)-producing cells were identified as targets, target genes, mRNA of associated genes, target genes and co-staining for Venus positive cells. As a result, KOR developed cells that were involved in the control of GnRH secretion. Venus positive cells were used to develop the next generation of cells. This study established the results of multiple system genetic analysis of Venus-positive cells, and the results of previous studies and the correlation between this study and the results were obtained. Statistical analysis of the behavior, KOR found that the same cells are very important results

项目成果

パルス状性腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)分泌の発生メカニズムについて

脉冲式促性腺激素释放激素 (GnRH) 分泌机制

• 发表时间: 2017
• 作者: 高橋 宙大，中村 翔，戴 明道;後藤 哲平，平林 真澄，池上 花奈;上野山 賀久，束村 博子，美辺 詩織;松田二子;前多 敬一郎
• 通讯作者: 前多 敬一郎

Identification of kappa-opioid receptor-expressing cells associated with gonadotropin-releasing hormone (GnRH) secretion using transgenic rats

使用转基因大鼠鉴定与促性腺激素释放激素 (GnRH) 分泌相关的 kappa 阿片受体表达细胞

• 发表时间: 2017
• 作者: Chudai Takahashi;Mingdao Dai;Sho Nakamura;Teppei Goto;Masumi Hirabayashi;Kana Ikegami;Yoshihisa Uenoyama;Hiroko Tsukamura;Shiori Minabe;Fuko Matsuda;Kei-ichiro Maeda
• 通讯作者: Kei-ichiro Maeda

GnRHパルス発生機構におけるkappa-opioid receptor(KOR)発現細胞の役割

kappa-阿片受体（KOR）表达细胞在 GnRH 脉冲产生机制中的作用

• 发表时间: 2017
• 作者: 高橋 宙大，中村 翔，戴 明道;後藤 哲平，平林 真澄，池上 花奈;上野山 賀久，束村 博子，美辺 詩織;松田二子;前多 敬一郎
• 通讯作者: 前多 敬一郎