Biochemische und physiologische Funktionen des plastidären Transportproteins Brittle1(BT1) in mono- und dikotylen Pflanzen

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Für die Mitglieder der plastidären Brittle1(BT1)-Transporter- Familie wird jeweils eine spezifische Funktion innerhalb des Metabolismus von mono- und dikotylen Pflanzen angenommen. Bis heute gibt es nur wenige biochemische und physiologische Analysen zu diesen BT1-Transportproteinen. Wir möchten mit Hilfe molekularbiologischer, biochemischer und physiologischer Methoden das Wissensspektrum über diese Transporterfamilie erweitern. Die Biochemie der BT1-Homologe soll durch funktionelle heterologe Expression in Escherichia coli und anschließenden Aufnahme-Experimenten analysiert werden. Die physiologische Einbindung der BT1-Homologe in dikotylen Pflanzen soll exemplarisch am BT1 aus Arabidopsis thaliana (AtBT1) durch die Analyse verschiedener transgener Arabidopsis-Pflanzen geklärt werden: 1. Für umfangreiche Expressionsanalysen sollen AtBT1- Promotor-GUS-Pflanzen hergestellt werden. 2. Nach Herstellung und Screening von AtBT1- knock-out -Mutanten bzw. AtBT1- RNAi-Pflanzen, soll der Einfluss einer ausgeschalteten bzw. reduzierten Transportaktivität des AtBT1 mittels verschiedener Techniken (Metabolitenbestimmung, Enzymaktivitätstests, Micro- Array-Analysen, etc.) auf den primären und sekundären Metabolismus bestimmt werden.