ｐ６２の細胞質－核間移行に着目した新規パーキンソン病発症メカニズムの解明

我々は、これまでに、低濃度パーキンソン病（Parkinson's disease: PD）関連化学物質が多機能タンパク質p62の核内蓄積を引き起こすことを明らかにしてきた。本研究では、p62の核内における新規機能および核内蓄積メカニズムを解明し、PD発症におけるp62核内蓄積の役割を明らかにすることを目的とした。本年度も、「p62の核内における機能解明」に向けて、p62の核内における新規結合タンパク質（2018年度に同定）との結合部位特定に取り組んだ。昨年度、組換えタンパク質を用いた実験系に困難が生じたため、HeLa細胞を用いた実験系を新たに構築し、免疫沈降およびウェスタンブロッティングにより結合部位を絞り込んだ。また、本年度は、「p62核内蓄積メカニズムの解明」にも取り組んだ。低濃度PD関連化学物質MPP+がCRM1をはじめとする数種類の細胞質-核間移行関連タンパク質の発現量に及ぼす影響を評価したところ、いずれのタンパク質においても顕著な発現変動は認められなかった。また、p62の核内輸送に関与するp62自体のリン酸化状態（Thr269/Ser272）にも顕著な変化は認められなかった。今後、p62の新規結合タンパク質との結合部位を特定し、p62の核内における機能を明らかにしたい。また、細胞質-核間移行に関与する他のタンパク質や各タンパク質間の相互作用等にも着目し、p62核内蓄積メカニズムについても明らかにしたい。

我々は、これまでに、低濃度パーキンソン病（Parkinson's disease: PD）関連化学物質が多機能タンパク質p62の核内蓄積を引き起こすことを明らかにしてきた。本研究では、p62の核内における新規機能および核内蓄積メカニズムを解明し、PD発症におけるp62核内蓄積の役割を明らかにすることを目的とした。本年度も、「p62の核内における機能解明」に向けて、p62の核内における新規結合タンパク質（2018年度に同定）との結合部位特定に取り組んだ。昨年度、組換えタンパク質を用いた実験系に困難が生じたため、HeLa細胞を用いた実験系を新たに構築し、免疫沈降およびウェスタンブロッティングにより結合部位を絞り込んだ。また、本年度は、「p62核内蓄積メカニズムの解明」にも取り組んだ。低濃度PD関連化学物質MPP+がCRM1をはじめとする数種類の細胞質-核間移行関連タンパク質の発現量に及ぼす影響を評価したところ、いずれのタンパク質においても顕著な発現変動は認められなかった。また、p62の核内輸送に関与するp62自体のリン酸化状態（Thr269/Ser272）にも顕著な変化は認められなかった。今後、p62の新規結合タンパク質との結合部位を特定し、p62の核内における機能を明らかにしたい。また、細胞質-核間移行に関与する他のタンパク質や各タンパク質間の相互作用等にも着目し、p62核内蓄積メカニズムについても明らかにしたい。