ＤＮＡメチル化酵素・脱メチル化酵素の肝特異的ノックアウトマウスの表現型解析

DNA甲基转移酶/去甲基酶肝脏特异性基因敲除小鼠的表型分析

• 批准号: 18J14635
• 负责人: 井口 恵里子
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J14635/
• 关键词: DNAメチル化酵素; 肝細胞癌; 炎症性発癌; DNAメチル化

肝細胞癌の多くはウイルス感染やNASHといった慢性炎症を基礎として発生する。この炎症性発癌過程におけるゲノム異常については多数の報告があるが、DNAメチル化などのエピゲノム制御の機序については不明な点が多い。新規DNAメチル化酵素の中でも、Dnmt3bは活発に転写される遺伝子に特異的に作用することが近年報告され、その異常が発癌に関与する可能性を示唆している。本研究では、Dnmt3bの異常がDNAメチル化変化を介して肝発癌過程において果たす役割を明らかにすることを目的とする。肝細胞特異的Dnmt3bノックアウト（KO）マウスを作成し、チオアセトアミド（TAA）投与により慢性肝炎を惹起してその表現型を解析した。また、TAA投与前またはTAA4週投与後のコントロールマウス及びDnmt3bKOマウスの非腫瘍肝組織より抽出したRNAを用いてトランスクリプトーム解析を行い、遺伝子発現プロファイルを比較した。TAA4週投与後にはDnmt3bKOマウスでより強い肝炎が見られた。TAA30週投与後にはDnmt3bKOマウスでより強い肝線維化が見られ、コントロールマウスと比較して有意に多くの肝癌が発生した。非腫瘍肝組織より抽出したRNAを用いたトランスクリプトーム解析では、TAA非投与・4週投与のいずれの条件下でも、Dnmt3bKOマウス肝において酸化的リン酸化関連遺伝子群の発現低下を認めた。また、Dnmt3bKOマウスの非癌部肝組織では、酸化ストレスマーカーである8-OHdGが高発現していることが確認された。これらの結果は、Dnmt3bが欠損するとミトコンドリアの機能低下から酸化ストレスの蓄積をきたし、炎症の増悪及び発癌の促進を生じる可能性を示唆する。以上より、Dnmt3bは酸化的リン酸化の恒常性維持を介し、炎症性肝発癌において防御的に機能している可能性が考えられる。

Hepatocellular carcinoma is often caused by NASH infection and chronic inflammation. This inflammatory process of cancer development may be abnormal, but most of the reports may not be accurate, and the DNA may be abnormal, but the mechanism of cancer control may be unclear. The new regulation of DNA polymerase chain reaction, Dnmt3b, has been reported in recent years. The present study aims to investigate the role of Dnmt3b in the development of liver cancer. Hepatocyte-specific Dnmt 3b gene expression was determined by PCR and analysis of the phenotype associated with chronic hepatitis. Compared with TAA 4 weeks before and after TAA administration, TAA was able to extract RNA from non-cancerous liver tissue and analyze the RNA expression. TAA 4 weeks after the vote and Dnmt 3bKO TAA 30 weeks after the launch of Dnmt 3bKO Analysis of RNA expression in non-cancerous liver tissue under conditions of TAA non-administration and 4 weeks post-administration, Dnmt3bKO expression in liver tissue under conditions of TAA non-administration and 4 weeks post-administration, Dnmt3bKO expression in liver tissue under conditions of TAA non-administration and 4 weeks post-administration. Dnmt 3bKO is a non-cancerous liver tissue that is highly expressed in 8-OHdG. The results indicate that Dnmt3b is deficient in protein and that it is likely to increase the accumulation of protein, inflammation, and cancer. Dnmt3b may be involved in the maintenance of chronic acidification and the development of inflammatory liver cancer.

项目成果

The role of DNA methyltransferase (DNMT) 3B in regulating inflammation-associated hepatocarcinogenesis

DNA甲基转移酶（DNMT）3B在调节炎症相关肝癌发生中的作用

• 发表时间: 2019
• 作者: Eriko Iguchi;Atsushi Takai;Ken Kumagai;Soichi Arasawa;Haruhiko Takeda;Yuji Eso;Takahiro Shimizu;Ken Takahashi;Yoshihide Ueda;Hiroshi Seno
• 通讯作者: Hiroshi Seno

DNAメチル化酵素DNMT3Bの欠損は酸化ストレスを介し炎症性肝発癌を促進する

DNA 甲基转移酶 DNMT3B 缺陷通过氧化应激促进炎症性肝癌发生

• 发表时间: 2020
• 作者: 井口恵里子;髙井淳;妹尾浩
• 通讯作者: 妹尾浩

炎症性肝発癌過程におけるDNAメチル化酵素DNMT3Bの役割

DNA甲基转移酶DNMT3B在炎症性肝癌发生过程中的作用

• 发表时间: 2020
• 作者: 井口恵里子;髙井淳;妹尾浩
• 通讯作者: 妹尾浩