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マラリア原虫の寄生コミットメントを決定する分子機構の解明

阐明决定疟原虫寄生的分子机制

基本信息

批准号：
18J23320
负责人：
村田優穂
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

【肝細胞認識に必要な6-cysタンパク質P-41の局在】昨年度までの研究によって、P41が肝細胞を認識し運動ステージから寄生ステージへの転換に必須な分子であることが明らかになった。本年度は、昨年に確立したdouble-CRISPR Cas9 システムを利用し、P41タンパク質のN末端にエピトープタグを挿入し、局在の検出に成功した。その結果、P41がP36pと同様に、スポロゾイトのマイクロネームに局在することが明らかになった。この結果により、P36pとP41が同様の働きを担っているというこれまでのノックアウト研究の結果が、タンパク質の細胞内における挙動という面からも確認された。【転写因子AP2-Sp3の解析】我々はこれまで、スポロゾイト期の転写を制御する分子としてAP2-SpとAP2-Sp2を解析してきた。AP2-Spは蚊の中腸におけるスポロゾイト形成期初期から発現し、スポロゾイト期全体の転写制御を担う。一方、AP2-Sp2は蚊の中腸において発現し、スポロゾイト形成に必要な遺伝子群の制御を担う。しかしながら、これらのみで中腸スポロゾイトから唾液腺スポロゾイトへの性状の変化を説明することはできない。そこで、我々は機能未知のAP2ファミリータンパク質の発現プロファイル解析結果から、AP2-Sp3を同定した。さらに、AP2-Sp3にGFPタグを融合させ、抗GFP抗体を用いたChIP-sequenceによって、標的遺伝子を網羅的に同定した。その結果、スポロゾイトの肝細胞侵入に必要な分子が主に同定された。また、蚊の中腸から唾液腺への移行に関与するタンパク質も同定された。この結果から、AP2-Sp3がAP2-Sp2以後の機能、すなわちスポロゾイトの唾液腺以降や肝細胞侵入期の遺伝子群を制御していることが明らかになった。

[Liver Cell Recognition Essential 6-cys/P-41] Last year's research on liver cell recognition essential 6-cys/P-41 was conducted. This year, we have established the successful use of double-CRISPR Cas9 system, P41 system and N-terminal system. Results: P41, P36p, P36p, P36p The results of this study are as follows: P36p and P41 are the same. [Analysis of AP2-Sp3] I have no choice but to analyze AP2-Sp2 in the context of the analysis of AP2-Sp3. AP2-Sp is responsible for the development and control of the whole process in the early stage of the formation of the midgut. One side, AP2-Sp2, is responsible for the development and control of the necessary genetic subgroups for the formation of the complex. A description of the changes in the characteristics of the salivary glands AP2-Sp3 is the same as AP2-Sp3. In addition, AP2-Sp3 GFP fusion, anti-GFP antibody use in the ChIP-sequence, target gene capture and identification As a result, the essential molecules for hepatocyte invasion are identified. It is related to the migration of salivary glands in the midgut and the quality of the body. As a result, AP2-Sp3 and AP2-Sp2 function, the salivary glands are used to reduce the invasion period of hepatocytes and control the subgroup.