半月周性産卵リズムの形成機構：潮汐を伝える体内時計の関わりと分子基盤の解明

半月产卵节律的形成机制：阐明传递潮汐的生物钟的参与及其分子基础

• 批准号: 20H03288
• 负责人: 安東 宏徳
• 金额: $ 11.65万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03288/
• 关键词: 生殖神経内分泌系; 体内時計; 潮汐サイクル; 半月周リズム; 概潮汐時計; 月周リズム; 生殖リズム

本研究では、概潮汐時計の機能的分子基盤の解明を目指して、潮汐サイクルおよび月齢に同調して発現する遺伝子群を網羅的に探索すると共に、それらの遺伝子の発現抑制による半月周性の産卵行動リズムへの影響を検討する。また、概潮汐時計と概日時計から構成されると考えられるリズム発振機構による生殖神経内分泌系の周期的調節の機能形態学的基盤を解明する。さらに、より普遍的な生物リズムの研究としての展開を目指し、半月周性リズムのOntogenyを解明する。令和3年度は、次の3つの研究成果を得た。1）潮汐サイクルと半月周性リズムに関連する遺伝子群を探索する試料として、産卵リズムの異なる伊豆川奈と佐渡姫津において、大潮と小潮の日の夕刻にクサフグ成魚を捕獲して脳を採取した。2）潮汐サイクル/半月周性リズムを作る時計候補遺伝子の機能解析のため、Vivo-モルフォリノによる遺伝子発現抑制実験系を検討した。脳髄膜で作られる糖たんぱく質であるエペンジミン（EPN）を標的遺伝子として、Vivo-モルフォリノ(EPN-MO)の配列、投与量、投与方法を検討した。また、ウェスタンブロット法と免疫染色法を用いたEPNタンパク質の解析系を確立した。EPN-MOを投与した個体では、遊泳阻害が見られたが、EPNタンパク質量の変化は検出されなかった。3）クサフグ仔稚魚に潮汐サイクルや月齢に同調したリズムがあるのかどうかを明らかにするため、産卵期に親魚を採集して人工授精を行い、仔稚魚を育成した。DanioVisionを用いて、クサフグ仔稚魚の自発行動リズムを解析した結果、成長段階によって明暗周期に関して自発行動リズムが異なることや明暗の切り替え時に自発行動量が高くなることなど、クサフグが独自の光応答性を持つ可能性が示された。さらに、EthoVision XTを用いたクサフグ幼魚の自発行動解析系を確立した。

This study で は, almost tidal gauge の functional molecular base plate の interpret を refers し て, tidal サ イ ク ル お よ び month 齢 に homology し て 発 now す る heritage 伝 subgroup を snare に explore す る と に, そ れ ら の posthumous son 伝 の 発 now inhibit に よ る half weeks sex の spawn action リ ズ ム へ の influence を beg す 検 る. ま た, almost tidal gauge と almost daily hour meter か ら constitute さ れ る と exam え ら れ る リ ズ ム 発 vibration institutions に よ る god 経 reproductive endocrine function of regulating の is の cycle morphology of substrate を interpret す る. さ ら に, よ り common な biological リ ズ ム の research と し て の expand を refers し, half weeks リ ズ ム の Ontogeny を interpret す る. The research results of the third year of the Reiwa era を obtained た. 1) tidal サ イ ク ル と half weeks sex リ ズ ム に masato even す る heritage 伝 subgroup を explore す る sample と し て, spawning リ ズ ム の different な る izu kawana と sado 姫 tianjin に お い て, tide と neap の の day evening carved に ク サ フ グ fish を capture し て 脳 を take し た. 2) tidal サ イ ク ル / half weeks sex リ ズ ム を make る meter alternate heritage 伝 son の function analytical の た め, the Vivo - モ ル フ ォ リ ノ に よ る posthumous son 伝 発 now inhibit be 験 department を beg し 検 た. 脳 で of the marrow film ら れ る sugar た ん ぱ く qualitative で あ る エ ペ ン ジ ミ ン (EPN) を mark heritage 伝 son と し て, the Vivo - モ ル フ ォ リ ノ (EPN - MO) の columns, and quantity, shots and methods を beg し 検 た. ま た, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト と immune staining method を with い た EPN タ ン パ ク qualitative analytical department を の establish し た. EPN -mo を cast with し た individual で は, swimming resistance against が see ら れ た が, EPN タ ン パ ク quality の variations change は 検 out さ れ な か っ た. 3) ク サ フ に tides of グ larvae サ イ ク ル や month 齢 に homology し た リ ズ ム が あ る の か ど う か を Ming ら か に す る た め, spawning period only に を acquisition し て を of artificial insemination を い, larvae breeding し た. DanioVision を with い て, ク サ フ の of グ larvae since 発 action リ ズ ム を parsing し た results, growth Duan Jie に よ っ て cycle of light and shade に masato し て since 発 action リ ズ ム が different な る こ と や の り cutting for light and shade when え に high amount since 発 action が く な る こ と な ど, ク サ フ グ が の light alone 応 answer sex を hold が つ possibility in さ れ た. Youdaoplaceholder0, EthoVision XTを established た た by using さらに た サフグ サフグ the analytic system of the spontaneous action of young fish <s:1> を.

项目成果

アカテガニの半月周性繁殖リズムの生理機構の理解に向けて

理解日本红蟹半月繁殖节律的生理机制

• 发表时间: 2021
• 作者: 豊田賢治;近藤裕介;鈴木信雄;大平剛;安東宏徳
• 通讯作者: 安東宏徳

Dim light at night stimulates melatonin production and may influence the expression of the GnRH, GnIH, and kisspeptin genes in the grass puffer

夜间昏暗的灯光会刺激褪黑激素的产生，并可能影响草鲀体内 GnRH、GnIH 和 Kisspeptin 基因的表达

• 发表时间: 2020
• 作者: Md. Mahiuddin Zahangir;Weronika Palkowska;丸山雄介;服部淳彦;安東宏徳
• 通讯作者: 安東宏徳

バングラデシュ農業大学/チャットグラム獣医動物大学(バングラデシュ)

孟加拉国农业大学/吉大兽医与动物大学（孟加拉国）

佐渡島沿岸におけるイボカギナマコの分布及び棲息環境の解明

佐渡岛沿岸伊波卡吉海参的分布和栖息地的阐明

• 发表时间: 2021
• 作者: 片田祐真;Chen Junfeng;沖村光祐;Guh Ying-Jey;中山友哉;丸山迪代;山口大輝;安東宏徳;佐藤綾人;吉村崇;豊田賢治，近藤裕介，鈴木信雄，大平剛，安東宏徳;江野脩太，片田祐真，黒川大輔，豊田賢治，飯田碧，吉村崇，安東宏徳;豊田賢治，大平剛，安東宏徳;浦野明央，小沼健，北橋隆史，安東宏徳，福若雅章，伴真俊，兵藤晋;鈴木倫明，安東宏徳，前田英雅，若林耕治;片田祐真，Chen Junfeng，沖村光祐，Guh Ying-Jey，中山友哉，丸山迪代，安東宏徳，吉村崇;梅田樹，中島崇志，大森紹仁
• 通讯作者: 梅田樹，中島崇志，大森紹仁

クサフグの半月周リズムに関するトランスクリプトーム解析.

河豚半月节律的转录组分析。

• 发表时间: 2022
• 作者: Zhang Xiao-Ting;Yu Yong-Yao;Xu Hao-Yue;Huang Zhen-Yu;Liu Xia;Cao Jia-Feng;Meng Kai-Feng;Wu Zheng-Ben;Han Guang-Kun;Zhan Meng-Ting;Ding Li-Guo;Kong Wei-Guang;Li Nan;Takizawa Fumio;Sunyer J. Oriol;Xu Zhen;片田祐真，Chen Junfeng，沖村光祐，山口大輝，Guh Ying-Jey，中山友哉，丸山迪代，古川祐子，中根右介，山本直之，佐藤良勝，安東宏徳，杉村麻子，田畑和文，佐藤綾人，吉村崇.;上野広海・瀧澤文雄・山本和弥・清水友斗・杉浦羅央・矢倉卓磨・大谷真紀・宮台俊明・末武弘章;顧文彬,Mariia Mokrina・Shenelle Pamela Bairan LIM,小林睦子,栖原健吾,長澤一衛,尾定誠;山口大輝，片田祐真，Chen Junfeng，沖村光祐，Guh Ying-Jey，中山友哉，丸山迪代，古川祐子，中根右介，山本直之，安東宏徳，杉村麻子，田畑和文，佐藤良勝，佐藤綾人，吉村崇;永田みのり・一色正・末武弘章・瀧澤文雄・宮台俊明;長澤一衛,金森誠,道総研,小林睦子,Mokrina Mariia,Yoon Jeongwoon,加藤嵩大,尾定誠;杉浦羅央・林忠弘・清水友斗・宮台俊明・瀧澤文雄・末武弘章;片田祐真，Chen Junfeng，沖村光祐，Guh Ying-Jey，中山友哉，丸山迪代，安東宏徳，吉村崇.
• 通讯作者: 片田祐真，Chen Junfeng，沖村光祐，Guh Ying-Jey，中山友哉，丸山迪代，安東宏徳，吉村崇.