胎生期の脳subplate損傷における過成熟反応の解析

胚胎脑亚板损伤过成熟反应分析

基本信息

  • 批准号:
    21K07839
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.75万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究は胎生期の脳subplate層に焦点を当て,炎症と虚血ストレスがsubplate層に髄鞘化の過成熟反応を誘導することを,ヒツジ胎仔を用いた動物実験で組織病理学,画像診断学,電気生理学的な解析によって証明する.同時にsubplate層の髄鞘化障害が脳回形成を変化させるかどうかも検証する.実験前にヒツジ胎仔を対照群,炎症群,低酸素群に分ける.妊娠95日に胎仔の頚動脈,羊水腔内にカテーテルを,胎仔の側頭皮下に脳波電極を留置する.またその際に低酸素群の胎仔のみ,臍帯動脈を1本結紮し,その後に胎仔を子宮内に戻して閉腹する.以後は胎仔動脈圧,羊水内圧,脳波を連続監視する.また24時間毎に動脈血血液ガス分析を行い,3群の動脈血酸素分圧,血中乳酸値を比較する.炎症群の母獣には,妊娠99日にリポポリサッカロイド 5 mgを羊水内に注入し,子宮内炎症を誘発する.妊娠105日に胎仔を剖検に供し,脳を灌流固定する.後日固定された脳はMRIを用いて検索する.またびまん性脳白質損傷とsubplate層の髄鞘化はグリア特異抗体 (NG2,O4,CNPase,PLP,GFAP) による免疫染色にLEA染色とTUNEL染色を加えて診断する.これらの結果から脳波解析においてsubplate層に特異的とされるdelta brushの異常と組織学的なsubplate層の細胞群の損傷と皮質形成異常の関連を統計学的に解析する.令和3年度は羊水中でのノイズ対策と測定精度の向上のため,皮下埋込部分での電位増幅が可能な機器を選定して胎児脳波の測定を試みた.delta brushを検出可能かどうか解析中である.令和4年度は前述のノイズ対策を行い,対照群2例の実験を実施した.しかしdelta brushの検出は困難であった.その後は脳波での連続監視を中止して炎症群2例を実施し,剖検により脳検体を採取した.
Focus of this study は TaiShengQi の 脳 subplate layer に を when て, inflammation と virtual blood ス ト レ ス が subplate layer に marrow sheath change の over mature anti 応 を induced す る こ と を, ヒ ツ ジ tire tsai を with い た animals be 験 で histopathology, portrait diagnostics, electric 気 physiology な parsing に よ っ て prove す る. At the same time, the にsubplate layer is affected by the transformation of the <s:1> myelin sheath, が脳 will form を transformation させる させる う う 検 検 検 evidence する. Before the experiment, にヒ にヒ ジ fetus を comparison group, inflammatory group, low acid group に score ける. At 95 days of gestation, に the 頚 artery of the fetus' s nucleus, にカテ in the amniotic cavity, テ を を を, に脳 wave electrode を under the scalp on the side of the fetus' s nucleus was indwelled する. ま た そ の interstate に low acid element group の tire tsai の み, umbilical 帯 artery ligation し を 1, そ の に tyres after wang を uterus に 戻 し て closed abdominal す る. Subsequently, the fetal arterial pressure, amniotic fluid internal pressure, 脳 waves を are connected to 続 for monitoring する. Youdaoplaceholder0 24 hours each に arterial blood ガス analysis を performance また, three groups of arterial blood acid fractionation, and comparison of blood lactate value を する. Inflammation group of female の 獣 に は, pregnancy 99 に リ ポ ポ リ サ ッ カ ロ イ ド に inside 5 mg を amniotic fluid injection し, womb inflammation を 発 lure す る. At 105 days of gestation, the に fetus を was dissected 検に for <s:1>, 脳を perfusion and fixation する. The next day, fix された脳 された脳 MRIを with された脳 て検 cable する. ま た び ま ん sex 脳 white matter lesions と subplate layer の marrow sheath change は グ リ ア specific antibodies (NG2, m1, CNPase, PLP and GFAP) に よ る immune dyeing に LEA と TUNEL staining を plus え て diagnosis す る. こ れ ら の results か ら 脳 wave parsing に お い て subplate layer に specific と さ れ る delta brush の abnormal と histological な subplate layer の と cortical cells の damage form abnormal の masato even を statistical analytical す に る. Make annual は amniotic fluid and 3 で の ノ イ ズ policy と seaborne の upward determination precision の た め, subcutaneous part buried 込 で な の potential rights が picture possible machine を selected し て tire where 脳 wave の determination を try み た. delta brushを検 is likely to be である う う である in う resolution. In the fourth year of the Reiwa era, the <s:1> aforementioned <s:1> ノ ズ ズ countermeasures を were carried out ノ, and the た measures were implemented against the two <s:1> actual cases を in the group. <s:1> であった delta brush 検 out of 検 difficult であった. After そ の は 脳 wave で の even 続 monitoring を suspended し て inflammation group of 2 cases of を be し, cutting 検 に よ り 脳 検 body を take し た.

项目成果

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The University of Western Australia(オーストラリア)
西澳大利亚大学
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