权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

細胞膜の局所ナノスーツ膜化による細胞内外ナノ観察のためのMEMS液体セル

用于细胞内和细胞内纳米观察的MEMS液体池，通过细胞膜的局部纳米服成膜

基本信息

批准号：
21K18190
负责人：
石田忠
金额：
$ 16.56万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K18190/
关键词：
電子顕微鏡細胞内観察電子線透過膜リポソーム細胞融合

项目摘要

本年度は、①細菌のプロトプラスト化とその走査電子顕微鏡(SEM)観察と②細菌捕捉のためのナノ孔の開発、③細胞サイズリポソームの形成、④細菌の電気的細胞融合に取り組んだ。①細菌のプロトプラスト化とそのSEM観察：　枯草菌をリゾチームと反応させて完全に細胞壁を除去し、棒状から球状に形状が変わることを確認した。ナノスーツ液に枯草菌プロトプラストを混合し、SEM観察したが、プロトプラストをSEM観察することはできなかった。②細菌捕捉のためのナノ孔の開発：　シリコン基板をTMAH溶液で異方性エッチングすることで、シリコン基板を貫通する孔を作った。シリコン基板の結晶欠陥やアンダーエッチングのために、開口が30 μm程度に拡がった。細菌の大きさが1 μm程度であることから、開口を微細化する必要がある。③細菌サイズリポソームの形成：　細菌と同サイズである1 μm級のリポソームを形成するため、10 μm以下の流路寸法のフローフォーカス構造を作製し、流路内部を疎水性と親水性で作り分けた。そのマイクロ流路を用いてリポソームを形成したところ、7 μm級の単分散性を有するリポソームが得られた。ただし、細菌サイズには届かなかったため、さらなる微細化と流量調整が必要であることが分かった。④細菌の電気的細胞融合：枯草菌をプロトプラスト化した上で、対向電極間に誘電泳動により数個レベルでプロトプラストの捕捉を行った。捕捉したプロトプラストにパルス電圧を印可したところ、プロトプラスト対を融合することに成功した。

This year, the following aspects were observed: ① bacterial growth and development, electron microscope (SEM) observation, ② bacterial capture and development, ③ cell growth and development, ④ bacterial electrical cell fusion. 1. SEM observation of bacteria: Bacillus subtilis is completely removed from the cell wall, and the shape of rod is confirmed. For example, if you want to use a liquid, you can use SEM to observe the mixture. (2) The opening of holes for bacteria capture: the holes in the substrate are formed by TMAH solution. The crystal structure of the substrate is not stable, and the opening is about 30 μm. The size of the bacteria is about 1 μm, and the opening is very small. (3) Formation of bacterial fluid system: formation of bacterial fluid system at the level of 1 μm, formation of fluid system at the level of 10 μm, formation of fluid system structure at the level of 10 μm, formation of fluid system at the level of 1 μm, formation of fluid system at the level of 1 The flow path is divided into two parts: one part is the flow path, the other part is the flow path It is necessary to adjust the flow rate of bacteria and bacteria 4. Cell fusion of bacteria: Bacillus subtilis cells are isolated from each other and captured by electrophoresis between electrodes. The power of the engine is very high.