Development of a method for the detection of microbial food web in terrestrial and aquatic environments by using compound specific stable isotope analysis of multiple amino acids

点击翻译按钮获取中文摘要

本年度は研究の２年目として、研究設備や実験に必要なシステム開発をさらに進めるのと並行して、試料の準備を行った。地球研においては、前年に引き続き分析環境の整備を進めた。測定値の妥当性検討のため、ガスクロマトグラフ-同位体比質量分析計（GC-C-IRMS）分析、分取アミノ酸のGC-C-IRMS分析、分取アミノ酸の元素分析計-同位体比質量分析計（EA-IRMS）分析の比較検討を予定しているが、試料の少量化のため、分析カラムを用いた試料分取ならびに調整法の見直しに着手した。陸上生態系研究の実施のため、植物試料および菌類に関連する試料を入手した。今後は実際の試料を用いた分析に向けての条件検討を行う。琵環研では前年に引き続き、高速液体クロマトグラフ-荷電化粒子検出器（HPLC-CAD）と分取コレクターを用いたアミノ酸分子別分取精製の手法を検討した。高速液体クロマトグラフ-蛍光検出器（HPLC-FLD）を用いたアミノ酸の濃度・組成の迅速分析手法についても、前処理工程や誘導体化条件について検討して改良を進め、微量試料での測定ができる見込みとなった。また、水圏の微生物群集由来有機物のアミノ酸窒素同位体比パターンを端成分として明らかにするため、琵琶湖表層湖水の微生物群集を用いた培養実験を実施した。人工湖水にグルコースと無機栄養塩を添加した培地に、孔経1.2μmのフィルターで濾過した湖水を少量加え、暗所20℃で振とうし、200日以上の長期間、時系列で試料水を採取し（25, 49, 76, 207日目）、濾過により粒子状有機物と溶存有機物を採取した。