肝移植後拒絶反応の病態解明と直接イオン化法による革新的迅速診断法の開発

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肝移植後合併症の中の急性拒絶反応は3～4割に発症し、その中の8％程度で難治性拒絶反応に移行し、時に移植肝機能不全の原因となる。また移植後の拒絶反応の治療に難渋することもしばしばあり、拒絶反応のより早期での診断・治療が重要である。拒絶反応の診断は、肝生検による病理学的評価がスタンダードであるが、出血などの合併症の可能性があり侵襲性が高い。そこで非侵襲的に拒絶反応を予測・診断することが重要と考え、直接イオン化法による質量分析法に注目した。本手法の利点は、多様性と迅速性があげられる。また中でも肝移植後にドレナージされている胆汁を中心に解析を行う事とした。胆汁は術後非侵襲的に採取可能であり、肝機能障害が出現する前後の検体を網羅的に解析することで、新たな拒絶反応のマーカーを検索するものである。胆汁および血液中の網羅的解析ならびにドナー由来ペプチド領域の物質抽出は直接イオン化法で、胆汁をイオン化させ質量分析を行う。拒絶反応が生じた際の前後の胆汁を比較することにより未知の領域のマーカーを網羅的に抽出する。なかでも拒絶反応が起きた際は、ドナー由来の主要組織適合性複合体分子に結合したタンパク質断片またはペプチドなどが有力なマーカーとして考えられる。物質分析イメージング法を利用した網羅的解析は肝生検で得られた検体の一部を可視化しながら質量ごとに解析できる物質分析イメージング法と呼ばれる技術を用いて、肝組織中で何が起こっているのかを中心に解析を行う。物質分析イメージング法はわずか1mm3程度の組織から様々な物質を、質量ごとに特異的に計測し、病理組織像に重ねて物質の局在を描出することが可能である。肝移植術後に肝機能障害を認め、拒絶反応が疑われた際は肝生検が行われるが、拒絶反応の病理学的特徴を評価して拒絶反応を可視化することによってその原因となるマーカーの探索を行う。