自己組織化に依存しない多細胞人工発癌オルガノイドモデルの開発と細胞連関解析

开发不依赖自组装和细胞关联分析的多细胞人工致癌类器官模型

• 批准号: 21K19476
• 负责人: 朝比奈 靖浩
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19476/
• 关键词: ヒトiPS細胞; オルガノイド; 肝細胞; 肝癌

発癌や病態形成には、標的細胞における後天的遺伝子異常の蓄積と、組織微小環境を構築する各細胞との細胞連関が関与すると考えられるが、肝臓においてはこの解析をin vitroで可能とする長期培養可能なヒト生理的成熟肝細胞株は存在しない。さらに生理的な培養肝細胞に遺伝子改変群を加えかつ構成細胞の均質化と定量化が可能な多細胞培養体がないために十分な知見は得られていない。本課題では以下を目的として研究を行った：1)長期培養可能なより生理的なヒト成熟肝細胞株の樹立、2)これに病態形成に関わる後天的遺伝子変異群を順次導入することによる、発癌過程をプロスペクティブに再現しうる人工的発癌モデルの構築、3)さらにこれと臓器を構成する各種細胞とを用いて、既報とは全く異なる自己組織化に依存しない多細胞オルガノイドの開発。種々の培養条件の探索を行った結果、肝細胞の形質を保持しつつ長期培養可能な肝細胞オルガノイドの培養法を見出した。得られたオルガノイドの形質を形態学的および網羅的遺伝子発現解析、一細胞解析等を用いて分析し、多細胞オルガノイド構築のための基盤情報を得た。また、ヒトiPS細胞においてゲノム編集を行い、肝癌の臨床検体で認められたゲノム情報を忠実に再現する遺伝子改変ヒトiPS細胞を複数株樹立した。特にウイルスゲノムが宿主ゲノムに挿入することが関与する病態形成過程において、癌化の初期段階に関わる機序を明らかとした。

Cancer is characterized by the formation of disease, the development of cancer cells, the accumulation of postnatal cancer cells, the tissue microenvironment monitoring, the cell link analysis of cancer cells, and the analysis of in vitro pathogenesis. mature liver cell lines that may undergo long-term development and physiology exist. In physiology, it is possible to quantify the number of cells in the liver by adding a group of cells to become cells. The objectives of this study are as follows: 1) long-term cultivation of mature liver cell lines that may lead to the development of physiological diseases. 2) after the formation of the disease, the second step of the study is to study the following objectives: 1) long-term cultivation of mature liver cell lines that may lead to the development of mature liver cells. 3) all kinds of cell computers are designed to be used, and both of them are used to organize their own dependence on multi-cell computers. A variety of training conditions to explore the results of the test, liver cell morphology to maintain long-term culture, it is possible to use the liver cell culture method to obtain results. It is necessary to analyze the data of the Internet, such as sub-analysis, one-cell analysis, and multi-cell analysis. This is the first time that you can change the number of iPS cells to copy multiple strains of liver cancer cells. Special attention should be paid to the fact that the host is involved in the disease and the disease forms in the course of the disease, and the order of the mechanism in the early stage of canceration is clear.

项目成果

B型肝炎ウイルスのMLL4領域へのintegrationによる発癌メカニズムの解析

整合至乙型肝炎病毒MLL4区域的致癌机制分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 土屋 淳;柿沼 晴;朝比奈 靖浩
• 通讯作者: 朝比奈 靖浩

Factors associated with liver injury and prognosis in advanced cancer patients treated with immune checkpoint inhibitors.

与接受免疫检查点抑制剂治疗的晚期癌症患者肝损伤和预后相关的因素。

• DOI: 10.1111/hepr.13878
• 发表时间: 2023
• 期刊: Hepatology Reserch
• 作者: Kaneko S;Asahina Y;Nakagawa M;Murakawa M;Miyazaki Y;Asakage T;Fukuda S;Namiki T;Kano Y;Nagata M;Tsuchiya J;Miyoshi M;Kitahata-Kawai F;Nitta S;Itsui Y;Kakinuma S;Okamoto R.
• 通讯作者: Okamoto R.

トiPS細胞を利用したHBV関連肝細胞におけるMLL4の機能的意義の検討．

使用人 iPS 细胞检查 MLL4 在 HBV 相关肝细胞中的功能意义。

• 发表时间: 2021
• 作者: 加納嘉人;北畑富貴子;村川美也子;柿沼晴;東正新;中川美奈;井津井康浩;新田沙由梨;三好正人;田邉稔;三宅智;池田貞勝;岡本隆一;朝比奈靖浩．;土屋淳，柿沼晴，朝比奈靖浩．
• 通讯作者: 土屋淳，柿沼晴，朝比奈靖浩．

HCC development and surveillance after SVR.

SVR 后 HCC 的发展和监测。

• 发表时间: 2022
• 作者: Takada H;Yamashita K;Osawa L;Komiyama Y;Nakakuki N;Muraoka M;Suzuki Y;Sato M;Takano S;Fukasawa M;Yamaguchi T;Maekawa S;Enomoto N;Asahina Y
• 通讯作者: Asahina Y

臨床薬理学

临床药理学

• 发表时间: 2021
• 作者: Kamikubo Kenta;Tsukamoto Osamu;Uyama-Saito Yuki;Oya Ryohei;Tsubota Tomoya;Fujino Noboru;Asano Yoshihiro;Kato Hisakazu;Matsuoka Ken;Takashima Seiji;朝比奈靖浩
• 通讯作者: 朝比奈靖浩