Induction of tissue-specific stem cells by novel transcription factors and/or small-molecule compounds

通过新型转录因子和/或小分子化合物诱导组织特异性干细胞

• 批准号: 21K19537
• 负责人: 野口 洋文
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19537/
• 关键词: iTS細胞; 転写因子; 低分子化合物

ES/iPS細胞の臨床応用化が進んでいるが、いまだ分化誘導効率の低い臓器・組織が多く存在する。我々のグループは、山中因子を用いて人工組織特異的幹細胞（iTS細胞）の作製に成功している。この細胞は分化誘導効率がES/iPS細胞より高いなどの利点があるが、iTS細胞の樹立にはiPS細胞作製技術を用いているため、作製時にiPS細胞の混入の可能性がある。本研究では、「山中因子以外」の因子を用いてiTS細胞を樹立することを目的としている。具体的には、(1)YAP遺伝子によるiTS細胞の樹立、(2)新規遺伝子によるiTS細胞の樹立、(3) 低分子化合物によるiTS細胞の樹立を試みる。令和4年度は新規遺伝子によるiTS細胞の樹立を試みた。我々は、マウスES細胞、iTS-P細胞、および膵島細胞の遺伝子発現をMicroarrayで調査し、iTS細胞特異的遺伝子が1,794因子あることを確認した。1,794因子から文献調査などにより21因子に絞り込み、これらの因子を発現するプラスミドを作製し、21因子すべてを細胞内へ導入したところ、iTS細胞と形態のよく似たコロニーが出現することを確認した。その後、iPS細胞樹立時に因子を絞り込んだ方法と同じ手法（1因子ずつ抜いていく方法）で因子を絞り込み、3因子でiTS-P細胞を樹立することに成功した（特許取得予定のため因子は非公開）。この細胞は、iPS細胞作製技術（従来法）で樹立したiTS-P細胞と形態が良く似ており、膵幹細胞特異的マーカーの発現、およびインスリン分泌細胞への分化も確認された。さらに奇形腫形成は認められず、「iTS-P細胞」であることが明らかとなった。

The clinical applications of ES/iPS cells are limited by the fact that the efficiency of differentiation induction is low and that there are many organs and tissues. We have successfully produced artificial tissue-specific stem cells (iTS cells) using Yamanaka factors and Yamanaka factors.このcellはdifferentiation induction efficiencyがES/iPS cellsより高いなどの利Pointがあるが、iTS cellsのtree The company's iPS cell production technology is unique and there is no possibility of contamination of iPS cells during production. This study aims to establish factors other than "Yamanaka factors" using iTS cells. Specifically, (1) establishment of YAP-derived TS cells, (2) establishment of new-regulation TS cells, and (3) establishment of low-molecular compound TS cells. The establishment and trial of iTS cells will be carried out in accordance with the new regulations of the 4th year of Reiwa. We have investigated 1,794 factors specific to iTS cells, such as ES cells, iTS-P cells, and microarray of および赵岛 cells. 1,794 factors から literature survey などにより 21 factors に twist り込み, これらのfactor を発成するプラスミドをproduced し, The introduction of 21 factors into the cells and the appearance of iTS cells in the same morphology are confirmed.その后、When iPS cells are established, the factor を twisting り込んだ method and the same technique (1 factor ずついていく method) でfactor をThe establishment of 3-factor iTS-P cells and 3-factor iTS-P cells has been successful (licensed and undisclosed). Our cell and iPS cell production technology (original method) has been established, and our iTS-P cells have good and similar morphology.おり, stem cell specific マーカーの発 appear, およびインスリン secretory cell へのdifferentiation confirmation された. "iTS-P cells" are known to have strange-shaped tumours.

项目成果

Pancreas Preservation with a Neutrophil Elastase Inhibitor, Alvelestat, Contributes to Improvement of Porcine Islet Isolation and Transplantation.

• DOI: 10.3390/jcm11154290
• 发表时间: 2022-07-23
• 期刊: JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE
• 影响因子: 3.9
• 作者: Otsuka, Ryusei;Miyagi-Shiohira, Chika;Kuwae, Kazuho;Nishime, Kai;Tamaki, Yoshihito;Yonaha, Tasuku;Sakai-Yonaha, Mayuko;Yamasaki, Ikuo;Shinzato, Misaki;Saitoh, Issei;Watanabe, Masami;Noguchi, Hirofumi
• 通讯作者: Noguchi, Hirofumi

RNA analysis based on a small number of manually isolated fixed cells (RNA-snMIFxC) to profile stem cells from human deciduous tooth-derived dental pulp cells.

• DOI: 10.1186/s12575-021-00149-5
• 发表时间: 2021-06-11
• 期刊: Biological procedures online
• 影响因子: 6.4
• 作者: Inada E;Saitoh I;Kubota N;Iwase Y;Kiyokawa Y;Noguchi H;Yamasaki Y;Sato M
• 通讯作者: Sato M

Preservation of pancreas in the University of Wisconsin solution supplemented with AP39 reduces reactive oxygen species production and improves islet graft function

• DOI: 10.1111/ajt.16401
• 发表时间: 2020-12-25
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF TRANSPLANTATION
• 影响因子: 8.8
• 作者: Nishime, Kai;Miyagi-Shiohira, Chika;Noguchi, Hirofumi
• 通讯作者: Noguchi, Hirofumi

Pancreas Preservation in Modified Histidine-lactobionate Solution Is Superior to That in University of Wisconsin Solution for Porcine Islet Isolation

• DOI: 10.1097/tp.0000000000003636
• 发表时间: 2022-09-01
• 期刊: TRANSPLANTATION
• 影响因子: 6.2
• 作者: Sakai-Yonaha，Mayuko;Miyagi-Shiohira，Chika;Noguchi，Hirofumi
• 通讯作者: Noguchi，Hirofumi

Induced hepatic stem cells are suitable for human hepatocyte production.

诱导的肝干细胞适用于人肝细胞的产生。

• DOI: 10.1016/j.isci.2022.105052
• 发表时间: 2022-10-21
• 期刊: ISCIENCE
• 影响因子: 5.8
• 作者: Nakashima, Yoshiki;Miyagi-Shiohira, Chika;Saitoh, Issei;Watanabe, Masami;Matsushita, Masayuki;Tsukahara, Masayoshi;Noguchi, Hirofumi
• 通讯作者: Noguchi, Hirofumi