放射線発がんの“芽”におけるゲノム変異解析～最初のドライバー遺伝子変異を探せ～

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原発事故や医療被ばく、職業被ばくでは、低線量放射線による発がんリスク評価が最重要課題である。これまでに放射線が誘発したがんのゲノム変異解析が多数行われているが、放射線による直接のがん化のメカニズムを説明しうる遺伝子変異（ドライバー遺伝子変異）は十分には捉えられていない。幹細胞は発がんの起源細胞とされるため、幹細胞を追跡すれば、がんの最初期を捉えることが可能であると考えられる。本研究では幹細胞とその子孫細胞を追跡することができる細胞系譜追跡技術を用い、被ばく後の乳腺組織において、がんの最初期の“芽”であるクローン性増殖を捉え、それをゲノム解析することにより、放射線誘発乳がん最初期の遺伝子変異を同定することを目的としている。前述のクローン性増殖のゲノム解析のための確立すべき実験手法として、昨年度は通常のパラフィン切片における蛍光タンパク質の免疫染色の条件決定と、透明化組織のパラフィン切片化とHE染色に成功した。今年度は、この切片を用いた蛍光タンパク質の免疫染色の染色条件を確立した。また、組織切片から遺伝子解析を行うために、細胞を分離するレーザーマイクロダイセクションの技術習得を行った。乳管を構成する内腔細胞と基底細胞それぞれの細胞系譜追跡が可能なマウスモデルを用い、被ばく後の細胞系譜追跡を行った。4週齢でタモキシフェンを投与後、放射線を照射し、基底細胞の細胞系譜追跡を行ったところ、照射後12週までの期間においては、照射の有無によるクローンの変化は現時点では観察されていない。