Causative effect of phosphate groups on the allergenicity of casein components: Improvement of diagnostic accuracy for milk allergy.

磷酸基团对酪蛋白成分致敏性的影响：提高牛奶过敏的诊断准确性。

• 批准号: 21K13505
• 负责人: 内藤 宙大
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Nagoya University of Arts and Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K13505/
• 关键词: 牛乳アレルギー; カゼインホスホペプチド; カゼイン; 脱リン酸化; 抗体結合能; アレルゲン性; リン酸基

本研究では、カゼインホスホペプチド（CPP）及びカゼインを脱リン酸化することで抗体結合能及びアレルゲン性が変化するかどうかを検討することを目的とした。令和４年度は、CPP及びカゼインをアルカリホスファターゼにより脱リン酸化処理させた試料を用いて抗体結合能を解析した。試料の脱リン酸化の程度は、Phos-tag SDS-PAGEにて確認した。脱リン酸化されたことを確認した試料を用いて阻害ELISAを行った。その結果、anti-casein rabbit IgG、牛乳アレルギー患者血清中IgEともに、脱リン酸化により抗体結合能が低下した。また、anti-casein rabbit IgGにおいて、試料の脱リン酸化の程度が大きいほど抗体結合能が低下した。さらに、エピトープとして重要な領域だと仮説だてたSSSEEを含むアミノ酸配列の合成ペプチドをリン酸基の有るものと無いもので作製し、ドットブロット及び阻害ELISAにて抗体結合能を解析した。その結果、リン酸基のあるペプチドで反応が強く、リン酸基のないペプチドでは反応がほとんどみられなかった。これらの結果から、カゼイン及びCPPの抗体反応にはアミノ酸配列中のSSSEEのリン酸基が重要な役割を果たしていることが示唆された。令和５年度は、上記の実験について、耐性獲得患者血清や遷延するアレルギー患者血清のIgG4抗体を用いて同様の解析を試みる。さらに、カゼインを食品加工することで脱リン酸化できないか検討し、乳加工食品の低アレルゲン化を目指す。

This study is about the use of CPP, CPP and CPP. The binding ability of the antibody is the same as the antibody binding ability and the specificity of the antibody. Reiwa 4th fiscal year, CPP and びカゼインをアルカリホスファターゼにThe sample was subjected to derimanic acidification treatment and analyzed using the binding energy of the antibody. The degree of derimanic acidification of the sample was confirmed, and the Phos-tag SDS-PAGE was confirmed. Dehydration and acidification of the sample was confirmed by blocking the ELISA test.そのResults, anti-casein rabbit IgG, IgE ともに in the serum of cow's milk アレルギー patient, and the binding ability of the de-リン acidified により antibody was low した.また、anti-casein rabbit IgGにおいて、The degree of acidification of the sample is not large and the antibody binding energy is low.さらに、エピトープとしてImportant fieldだと仮说だてたSSSSEEをcontaining むアミノacid ligation and synthesis ペプチドをリThe ンacidic acid-based esters are made of いもので, the ドットブロット and the びblocking ELISA are used to analyze the antibody binding energy.そのRESULT, リン acid base のあるペプチドで Reflection 応が强く, リンAcid-based のないペプチドでは 濜がほとんどみられなかった. The results of これらのから, カゼイン and びCPPのantibodies against にはアミノacid are in the sequenceのSSSSEEのリン acid baseがimportantなservice cutをfruitたしていることがshows instigationされた. In the 5th year of Reiwa, the IgG4 antibody in the patient's serum and the resistance-acquired patient's serum were analyzed and tested.さらに, カゼインをfood processing することで de-リンacidification できないか検し, milk processed food のlow アレルゲン化を目す.

项目成果

Serine phosphate group in casein phosphopeptide is crucial for IgE binding to αs1-casein

酪蛋白磷酸肽中的丝氨酸磷酸基对于 IgE 与 αs1-酪蛋白的结合至关重要

• DOI: 10.1016/j.alit.2023.02.001
• 发表时间: 2023
• 期刊: Allergology International
• 影响因子: 6.8
• 作者: Naito Michihiro;Matsui Teruaki;Ito Komei;Izumi Hidehiko
• 通讯作者: Izumi Hidehiko

Putative allergic reactivity of casein phosphopeptide in severe cow’s milk allergy patients

严重牛奶过敏患者酪蛋白磷酸肽的推定过敏反应

• DOI: 10.1111/pai.13752
• 发表时间: 2022
• 期刊: Pediatric Allergy and Immunology
• 影响因子: 4.4
• 作者: Matsui Teruaki;Naito Michihiro;Kitamura Katsumasa;Makino Atsushi;Takasato Yoshihiro;Sugiura Shiro;Izumi Hidehiko;Ito Komei
• 通讯作者: Ito Komei