可塑性の制御による固形癌の革新的治療法の開発

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新規神経内分泌前立腺癌(NEPC)細胞株KUCaP13にAREluc(androgen response element luciferase)を導入したKUCaP13_ARElucとさらにARを強制発現させたKUCaP13_AREluc_ARを用いて96well plateでluciferase assayを行ったところ、KUCaP13_AREluc_ARでアンドロゲンを加えた細胞のみ発光を認めた。このことから、KUCaP13においてARElucによりAR活性を評価できることを確認した。続いて本学の「創薬拠点コアラボ」が保持する約1600種類の薬剤を用いてdrug screeningを行った。陰性コントロールの発光度を基準にcut offを定め、30種類の化合物をヒット化合物として同定した。今後は2nd screeningとして、偽陽性の除外と妥当性の検証を行う。具体的には先のヒット化合物を濃度をふった上でluciferase assayを行い、アンドロゲンを加えない陰性コントロールも作成し検証する。偽陽性でなかった化合物についてはqPCRやwestern blottingにおいてARやその下流であるKLK3などの発現に変化がないか検証する。候補化合物が複数の場合はそれらの組み合わせについても評価する。また、各化合物が既存のNEPC細胞株NCI-H660でも効果を示すか確認する。