Sema3Aによる下顎頭軟骨分化促進機構の解明と下顎後退症新規治療への応用

阐明Sema3A促进下颌髁突软骨分化的机制及其在下颌后缩新疗法中的应用

• 批准号: 22K10273
• 负责人: 麻川 由起
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10273/
• 关键词: Sema3A; 下顎頭軟骨; 成長発育

下顎後退症は、先天的あるいは後天的な下顎骨の成長不全の結果生じる顎顔面形態の一様相であるが、この形態変化を決定する要因は不明な点が多い。申請者らは、下顎頭軟骨成長のメカニズムを解明するために、近年骨粗鬆症を始めとする様々な疾患の鍵分子とされている Semaphorin3A (Sema3A) に着目し、研究を行ってきた。その結果、Sema3A が培養軟骨細胞の初期分化段階で高発現し、Aggrecan やⅡ型コラーゲン発現を増加させることを明らかとした。Sema3A は軟骨の初期分化を促進している可能性が考えられるものの、その詳細なメカニズムは不明である。本研究は、Sema3A による下顎頭軟骨分化促進メカニズムを検証することを目的とした。本年度では、Sema3A による Aggrecan およびⅡ型コラーゲン発現に対するSema3A レセプター(Nrp-1) の関与について検証した。培養軟骨細胞に対して、5ug/ml Nrp-1中和抗体存在下でSema3Aを添加したところ、5ug/ml Sema3AによるⅡ型コラーゲン遺伝子発現上昇を抑制する結果となった。この結果より、Sema3AによるⅡ型コラーゲン遺伝子発現促進機構はNrp-1を介している可能性が示唆された。次にNrp-1 中和抗体を用いてNrp-1ブロッキング後に、Sema3Aを14日目まで添加した後、アルシアンブルー染色を行い基質産生能へのNrp-1の関与について比較検討を行ったところ、基質産生能の抑制は認められなかった。この実験に関しては、実験条件の再検討を行う予定としている。

Mandible recession is caused by congenital or acquired mandible growth failure, resulting in a phase of facial morphology, which is determined by unknown factors. The applicant has been studying Semaphorin3A (Sema3A), a key molecule in the development of mandibular cartilage in recent years. The results showed that Sema3A was highly expressed in the initial differentiation stage of cultured chondrocytes, and Aggrecan II was highly expressed in the early stage of differentiation. Sema3A promotes the early differentiation of cartilage. The purpose of this study is to investigate the role of Sema3A in promoting mandibular cartilage differentiation. This year, Sema3A Aggrecan and Type II tests were conducted in relation to Sema3A aggregation (Nrp-1). In the presence of 5ug/ml Nrp-1 neutralizing antibody, Sema 3A was added to cultured chondrocytes to inhibit the increase of type II protein expression. As a result, Sema3A and Sema3A were identified as type II DNA fragments, and the Nrp-1 DNA fragment was identified as a potential fragment. Nrp-1 neutralizing antibody was used in the treatment of Nrp-1, Sema3A was added on the 14th day, and matrix production ability was detected in the treatment of Nrp-1. This is the first time that we've had a chance to discuss this issue.