植物FYVE1は細胞内グルタミンセンサーとして機能しているのか

点击翻译按钮获取中文摘要

本共同研究は「Pib2植物オルソログFYVE1が細胞内グルタミンセンサーとして機能し、TORC1を活性化するのか」を検証している。まずはFYVE1がTORC1経路を制御している可能性を検証するために、シロイヌナズナのFYVE1の機能欠失型変異株(fyve1-1)のTORC1活性をモニターした。その結果、fyve1-1株では野生株と比較して優位にTORC1活性が低下していた。しかしfyve1-1は発生の早い段階で致死のため、詳細な生化学的解析が困難であった。そこでFYVE1のドミナントネガティブ変異体を利用する手法を試みた。酵母Pib2においてはPib2のＣ末端がPib2によるTORC1の活性化に必須である。よってPib2のＣ末端欠損変異体の高発現はTORC1と結合するものの、活性化できないために生育阻害を引き起こす。同様にFYVE1のC末端欠損変異の高発現によってもTORC1に対するドミナントネガティブ効果が観察されるかを検討している。まずはシロイヌナズナ培養細胞でFYVE1のＣ末端欠損変異体の高発現を行った。その結果、変異体を高発現した細胞ではコントロール株と比較してグルタミンによるTORC1の活性化の程度が低下していた。このことはFYVE１Ｃ末端欠損変異体がグルタミンによるTORC1の活性化を阻害することを示唆している。また、シロイヌナズナのFYVE1のＣ末端欠損変異体の高発現株を作成することに成功した。現在この株におけるTORC1活性をモニターしようとしている。