測定対象の定量用標品を必要としない機能性色素成分のLC定量法の確立

食品に含まれる機能性関与成分や有効成分の含量を正確に定量することは，食の品質や安全性を確保する上で必要不可欠である。本研究では定量NMRに基づき算出される相対モル感度(RMS)係数を応用することで，測定対象とは異なる物質，すなわち，安価・安定で，正確な純度が担保された別の試薬の検量線を使って，誰でも機能性色素成分をHPLCで簡便・正確に定量する方法を確立することを目的とする。今年度においては，機能性ポリフェノールである一方で，食品安全委員会より一日上乗せ摂取目安量の上限値が提示されている大豆イソフラボン12種（9種類のイソフラボン配糖体及び3種類のイソフラボンアグリコン）、並びに機能性色素として知られるアントシアニン（今回はシアニジンとデルフィニジン及びそれぞれの配糖体の計8種）へのRMSを用いたSingle-reference HPLC法の適用を試みた。基準物質として，認証標準物質で正確な純度が担保されているカフェインを選択した。一般試薬として入手した大豆イソフラボン12種並びにアントシアニン8種の正確な純度を定量1H-NMR（1H-qNMR）によって求め，これを基に正確な濃度の標準原液と正確に希釈した複数濃度の溶液（5～10点、それぞれ3セット）を調製した。これらをHPLCに供して検量線を作成し，検量線式の傾きの比をRMS値として，カフェインに対する各イソフラボン及びアントシアニンのRMS値を求めた。いくつかの健康食品中の各成分をHPLCで分析し，同時に測定したカフェインの検量線から含量を見積もったところ，絶対検量線法より得られる定量値と有意差の無い結果が得られ，カフェインのみの検量線を使って，これらを正確に定量できることが示された。

食品に含まれる機能性関与成分や有効成分の含量を正確に定量することは，食の品質や安全性を確保する上で必要不可欠である。本研究では定量NMRに基づき算出される相対モル感度(RMS)係数を応用することで，測定対象とは異なる物質，すなわち，安価・安定で，正確な純度が担保された別の試薬の検量線を使って，誰でも機能性色素成分をHPLCで簡便・正確に定量する方法を確立することを目的とする。今年度においては，機能性ポリフェノールである一方で，食品安全委員会より一日上乗せ摂取目安量の上限値が提示されている大豆イソフラボン12種（9種類のイソフラボン配糖体及び3種類のイソフラボンアグリコン）、並びに機能性色素として知られるアントシアニン（今回はシアニジンとデルフィニジン及びそれぞれの配糖体の計8種）へのRMSを用いたSingle-reference HPLC法の適用を試みた。基準物質として，認証標準物質で正確な純度が担保されているカフェインを選択した。一般試薬として入手した大豆イソフラボン12種並びにアントシアニン8種の正確な純度を定量1H-NMR（1H-qNMR）によって求め，これを基に正確な濃度の標準原液と正確に希釈した複数濃度の溶液（5～10点、それぞれ3セット）を調製した。これらをHPLCに供して検量線を作成し，検量線式の傾きの比をRMS値として，カフェインに対する各イソフラボン及びアントシアニンのRMS値を求めた。いくつかの健康食品中の各成分をHPLCで分析し，同時に測定したカフェインの検量線から含量を見積もったところ，絶対検量線法より得られる定量値と有意差の無い結果が得られ，カフェインのみの検量線を使って，これらを正確に定量できることが示された。