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気孔開閉運動を制御する新奇カルシウムシグナル伝達機構の解析

控制气孔开闭运动的新型钙信号转导机制的分析

基本信息

批准号：
22K05560
负责人：
宗正晋太郎
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

植物の葉の表皮に存在する気孔は、一対の孔辺細胞からなる小孔であり、開閉運動を行うことでガス交換を調節する。孔辺細胞細胞質のカルシウムイオンは、気孔開閉運動の調節を行う孔辺細胞シグナル伝達において重要なセカンドメッセンジャーとして機能することが古くから知られている。本研究では、孔辺細胞シグナル伝達においてカルシウムイオンの輸送と感知に関与すると考えられる新規カルシウムイオンチャネル・細胞質カルシウムイオンセンサー候補因子の機能解析を進めている。シロイヌナズナT-DNA変異体コレクションからノックアウト変異体を得ることができなかったいくつかの遺伝子について、CRISPR/Cas9システムを用いて多重ノックアウト変異体の単離を行った。得られた多重変異体の気孔表現型解析を行い、候補遺伝子の機能重複を明らかにした。以上の植物の表現型解析により、気孔開閉運動の制御に関与することが明らかとなったGCMを含むカルシウムチャネル候補遺伝子について、アフリカツメガエル卵母細胞やHEK293細胞を異種発現系として用いた電気生理学実験を行い、イオン輸送活性の評価を試みたが顕著な活性は検出されず首尾に終わっている。そのため現在、タバコやシロイヌナズナの葉肉細胞プロトプラストなど発現系を植物に変更することを視野に入れて研究を進めている。細胞質カルシウムイオンセンサー候補因子であるキナーゼAについては、カルシウムイオンに依存した活性酸素種の蓄積に関与することを示唆する結果を得ている。

The epidermis of a plant has pores, pairs of pores and cells, and the opening and closing movement of the pores is regulated. The regulation of pore opening and closing movement in pore cytoplasm is important for the regulation of pore opening and closing movement in pore cytoplasm. This study is aimed at further elucidating the function of candidate factors in cellular systems, such as cellular systems, transport systems, and sensory systems. CRISPR/Cas9 is a multiple-use, multiple-use. The phenotype analysis of multiple heterozygotes was carried out, and the functional duplication of candidate genes was clarified. The phenotypic analysis of these plants is related to the regulation of pore opening and closing movement, including the selection of candidate oocytes and HEK293 cells, the development of heterogeneic development systems, the use of electrical physiology, and the evaluation of transport activity. The development of mesophyll cells in plants and their development in the field of vision Cytoplasm is A candidate factor that depends on the accumulation of active acid species.