アワビの生理活性ペプチドを指標とした成長、環境適応と性成熟の高感度診断法の開発

本研究は、エゾアワビの脳神経節で産生される有用な生理活性ペプチドの免疫測定系を確立し、それらペプチドのヘモリンパ液中の消長に基づいて、本種の成長、環境適応及び性成熟を高感度かつ正確に評価できる診断法を開発することを目的としている。本年度は、脳神経節およびヘモリンパ液に存在する生理活性ペプチド群の網羅解析を質量分析系により分析し、脳神経節からタキキニン、ニューロペプチドY（NPY）、セレブリン、生殖腺刺激ホルモン放出ペプチド（GnRH）およびインスリン関連ペプチドなど16種類のペプチドを検出した。一方、ヘモリンパ液からはNPY、GnRHおよびインスリン関連ペプチドなど11種類のペプチドを検出した。得られた結果に基づいて、脳神経節およびヘモリンパ液を1N塩酸/アセトン抽出、次いで、抽出残渣を80%アセトン抽出し、得られた抽出物を高性能液体クロマトグラフィーで分画し、NPYおよびGnRHの検出法について検討した。その結果、脳神経節の1N塩酸/ アセトン抽出物から合成GnRHの溶出位置と一致し、タコのGnRH抗体に反応するペプチドが、また、80%アセトン抽出物から合成NPYの溶出位置と一致し、アワビNPY抗体と反応するペプチドが検出された。一方、ヘモリンパ液の1N塩酸/アセトン抽出物から合成NPYの溶出位置と一致し、アワビNPY抗体と反応するペプチドが、また、合成GnRHの溶出位置と一致し、タコのGnRH抗体に反応するペプチドが検出された。これらのペプチドは、成長の良いオスとメスから検出されたが、成長の悪い個体からは検出されなかった。一方、食欲調節に関与すると予想されるセレブリン、また、血圧調節に関与するよ予想されるカルディオアクティブペプチドの抽出法および高性能液体クロマトグラフィーによる検出法について検討した。

本研究は、エゾアワビの脳神経節で産生される有用な生理活性ペプチドの免疫測定系を確立し、それらペプチドのヘモリンパ液中の消長に基づいて、本種の成長、環境適応及び性成熟を高感度かつ正確に評価できる診断法を開発することを目的としている。本年度は、脳神経節およびヘモリンパ液に存在する生理活性ペプチド群の網羅解析を質量分析系により分析し、脳神経節からタキキニン、ニューロペプチドY（NPY）、セレブリン、生殖腺刺激ホルモン放出ペプチド（GnRH）およびインスリン関連ペプチドなど16種類のペプチドを検出した。一方、ヘモリンパ液からはNPY、GnRHおよびインスリン関連ペプチドなど11種類のペプチドを検出した。得られた結果に基づいて、脳神経節およびヘモリンパ液を1N塩酸/アセトン抽出、次いで、抽出残渣を80%アセトン抽出し、得られた抽出物を高性能液体クロマトグラフィーで分画し、NPYおよびGnRHの検出法について検討した。その結果、脳神経節の1N塩酸/ アセトン抽出物から合成GnRHの溶出位置と一致し、タコのGnRH抗体に反応するペプチドが、また、80%アセトン抽出物から合成NPYの溶出位置と一致し、アワビNPY抗体と反応するペプチドが検出された。一方、ヘモリンパ液の1N塩酸/アセトン抽出物から合成NPYの溶出位置と一致し、アワビNPY抗体と反応するペプチドが、また、合成GnRHの溶出位置と一致し、タコのGnRH抗体に反応するペプチドが検出された。これらのペプチドは、成長の良いオスとメスから検出されたが、成長の悪い個体からは検出されなかった。一方、食欲調節に関与すると予想されるセレブリン、また、血圧調節に関与するよ予想されるカルディオアクティブペプチドの抽出法および高性能液体クロマトグラフィーによる検出法について検討した。