Elucidatting molecular mechanisms by which latently infected Toxoplasma gondii evades host immunity

阐明潜伏感染的弓形虫逃避宿主免疫的分子机制

• 批准号: 22K05979
• 负责人: 杉 達紀
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05979/
• 关键词: トキソプラズマ原虫; DUAL-Transcriptome; 免疫応答攪乱因子; プロモーター; トキソプラズマ症; 潜伏感染; 宿主寄生体相関

トキソプラズマ原虫は潜伏感染期において宿主免疫を回避しているが、その分子機序は不明である。本研究では、潜伏感染期特異的な宿主細胞制御を行えない組換え原虫を作出して、潜伏感染特異的な宿主細胞制御が原虫の宿主免疫回避能力に果たす役割を明らかにすることを目的としている。本年度は、急性感染期と潜伏感染期で異なる強さで宿主を制御している原虫の免疫活性化因子および抑制因子の絞り込みを完了した。候補因子の一つであるGRA15は潜伏期においては発現の減少が認められる免疫系活性化因子であり、潜伏期においても急性期と同等の発現を維持できれば潜伏期における宿主細胞免疫系の抑制を崩せると着想した。急性期における野生型GRA15の発現量と同等の遺伝子発現を急性期、潜伏期の両方のステージで実現可能なプロモーターをトランスクリプトーム解析から選定し、野生型のGRA15のプロモーターを該当プロモーターに置き換えた組換え原虫を作出した。組換え原虫のGRA15発現量が野生型原虫と比較して急性感染期において同等程度であり、潜伏感染においては野生型より増加していることを確認した。一方、潜伏期において宿主制御が観察されている免疫抑制因子の宿主細胞への移行を司るMYR1については潜伏感染期のみで発現を減少させるプロモーターへの置き換えを試みたが、適切な発現量を実現するプロモーターが発見できていない。そこで、プロモーターの強度を自在に操る手法を別途開発すべく、トキソプラズマのコアプロモーター領域の配列モチーフの解析を進めた。既報で報告されているコアプロモーター因子の一つであるチミジンリピート領域が原虫の感染期によらず保存されていることを発見し、ステージ特異的な発現量調整とは独立してプロモーター強度を操作できうる配列候補として同定された。

The incubation period of protozoa is unknown, and the molecular mechanism is unknown. The purpose of this study is to control the host immune avoidance ability of protozoa by host cells specific for latent infection. This year, the acute infection period and the latent infection period are significantly different, and the combination of immunoactive factors and inhibitory factors that control the host protozoa has been completed. A candidate factor GRA15 is a factor that activates the immune system during incubation, during acute phase, during maintenance, during incubation, during suppression of the host cell immune system. The expression of wild-type GRA15 in acute phase and the expression of equivalent genes in acute phase and incubation phase can be achieved by selecting and analyzing the expression of wild-type GRA15. The presence of GRA15 in group protozoa was similar to that of wild-type protozoa in acute infection stage, and the presence of latent protozoa in wild-type protozoa was confirmed. The host cell migration of immunosuppressive factors detected in MYR1 cells during incubation period decreases the occurrence of immunosuppressive factors during incubation period and increases the occurrence of immunosuppressive factors during incubation period. The strength of the system is determined by the method of operation, and the analysis of the system is carried out separately. The report indicates that the number of detection factors in the field of protozoan infection is different from that in the field of protozoan preservation. The number of detection factors in the field of protozoan infection is different from that in the field of protozoan infection. The number of detection factors in the field of protozoan infection is different