牛の子宮疾患バイオマーカーの評価に基づく子宮生化学検査の基盤構築

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実験1: 炎症マーカーであるC反応性蛋白（CRP）および3,14-dihydro-15-keto-Prostaglandin F2α（PGFM）の子宮生化学検査としての有用性を検証するため、細胞学的検査である好中球出現割合（PMN割合）をリファレンスとし、実験的炎症誘発モデルを用いて解析を行った。臨床現場で多用され子宮内への刺激により炎症を引き起こすことが知られているヨード剤を活用した。ホルスタイン種乳用牛（n=14）の発情周期の黄体期にヨード剤あるいは溶媒を子宮内に投与し、投与後1日において子宮洗浄液を回収した。回収液中のCRP、PGFMの濃度変化およびPMN割合を解析した。その結果、CRPおよびPMN割合はヨード剤投与群において有意に高く、PGFM濃度に両群間で有意な差は認められなかった。子宮洗浄液中のCRPは急性の炎症過程において敏感に反応する子宮内炎症マーカーであることが示された。実験2: 獣医臨床現場において牛の子宮生化学検査検体として子宮頸腟粘液（CVM）を活用する手法を検証した。CVMは粘稠性が高いため、測定誤差が生じやすい欠点がある。これを解消するため、過去の報告を参考にジチオトレイトールを用いた前処理法の活用を検証したところ、CVM検体からCRPおよびPGFMが検出され、CVMの子宮生化学検査材料としての有用性が示された。この成績を基盤として、ホルスタイン種乳用牛（n=8）の発情周期の黄体期にヨード剤あるいは溶媒を投与し、投与後1日にCVMを回収し、CRPおよびPGFM濃度の変化を解析した。その結果、ヨード剤投与後CVM中のCRP濃度は溶媒投与群に比べて有意に増加し、PGFM濃度は減少する傾向が観察された。実験1の成績を考えあわせると、子宮疾患診断を行う上での補助検査として、CVMが子宮生化学検査の検体として有用である可能性が示された。