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細胞外O-GlcNAc修飾によるペリサイト機能調節機構の解明

阐明细胞外O-GlcNAc修饰对周细胞功能的调节机制

基本信息

批准号：
22K06124
负责人：
近藤裕史
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本申請課題では細胞外O結合型Nアセチルグルコサミン（O-GlcNAc）糖鎖の付加酵素であるEogtの発現細胞の同定と、その細胞における意味付けである。初めに、Eogt発現細胞を同定するために様々な抗Eogt抗体を用い、マウス組織を対象に免疫組織染色を行った。その観察には高解像度共焦点レーザー顕微鏡を利用した。その結果、同一臓器内においても機能的に異なる領域に存在する血管が特異的に染色された。このことはひとえに血管といっても、糖鎖の観点から異なるサブセットが存在することを強く示唆するものである。さらに、様々な分子マーカーで染色したところ、Eogtを発現する血管の特徴化を明らかにすることができた。その血管は他の血管と比べてユニークであり、それがEogt発現たらしめる原理となる可能性が考えられた。そこでその血管に特徴的な外的刺激を培養血管内皮細胞に与えると、予想通り、Eogtの遺伝子発現の増加が認められ、その外的刺激に応答するEogt発現調節エレメントも同定することに成功した。そのユニークな血管特異的に赤色蛍光レポータータンパク質を発現させつつ、Eogtを欠失させるマウスを作製するため、LSL-tdTomato (Ai9)マウス、floxed Eogtマウス、ユニーク細胞特異的Creトランスジェニックマウスを交配させて目的のマウスを得た。現在、そのユニーク血管におけるEogtの機能を調べるため、病態発症マウスとの更なる交配を行っている。

the object of that present application is to determine the identity of extracellular O-binding N-terminal (O-GlcNAc) glycogen lock enzyme and its expression in cell. Eogt detection cells were identified with anti-Eogt antibodies, and tissues were stained with immune tissue. High resolution confocal microscopy The results show that the blood vessels in the same organ have different functions and specific staining. The blood vessels and the sugar locks are different. The characteristics of the blood vessels were identified by the molecular markers. The blood vessels are different from each other. In addition, the expression of Eogt gene in cultured vascular endothelial cells is regulated by the stimulation of vascular characteristics. The blood vessel specific red light is generated, the Eogt is lost, the LSL-tdTomato (Ai9) is lost, the cell-specific Cre is lost, and the mating is lost. The function of Eogt is regulated, and the disease is changed.