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細胞外O-GlcNAc修飾によるペリサイト機能調節機構の解明

阐明细胞外O-GlcNAc修饰对周细胞功能的调节机制

基本信息

批准号：
22K06124
负责人：
近藤裕史
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本申請課題では細胞外O結合型Nアセチルグルコサミン（O-GlcNAc）糖鎖の付加酵素であるEogtの発現細胞の同定と、その細胞における意味付けである。初めに、Eogt発現細胞を同定するために様々な抗Eogt抗体を用い、マウス組織を対象に免疫組織染色を行った。その観察には高解像度共焦点レーザー顕微鏡を利用した。その結果、同一臓器内においても機能的に異なる領域に存在する血管が特異的に染色された。このことはひとえに血管といっても、糖鎖の観点から異なるサブセットが存在することを強く示唆するものである。さらに、様々な分子マーカーで染色したところ、Eogtを発現する血管の特徴化を明らかにすることができた。その血管は他の血管と比べてユニークであり、それがEogt発現たらしめる原理となる可能性が考えられた。そこでその血管に特徴的な外的刺激を培養血管内皮細胞に与えると、予想通り、Eogtの遺伝子発現の増加が認められ、その外的刺激に応答するEogt発現調節エレメントも同定することに成功した。そのユニークな血管特異的に赤色蛍光レポータータンパク質を発現させつつ、Eogtを欠失させるマウスを作製するため、LSL-tdTomato (Ai9)マウス、floxed Eogtマウス、ユニーク細胞特異的Creトランスジェニックマウスを交配させて目的のマウスを得た。現在、そのユニーク血管におけるEogtの機能を調べるため、病態発症マウスとの更なる交配を行っている。

In this application, we apply for extracellular O-conjugated N-methyl-D-glucopyranoside (O-GlcNAc). The addition of enzymes to the Eogt shows that the cell cycle is the same as that of the normal cell. The cells of primary culture and Eogt were detected by immunocytochemistry. Anti-Eogt antibodies were detected by immunocytochemistry and immunocytochemical staining. To observe the high resolution, the common focus, the micro-resolution, and the utilization of the image. The results showed that there was a staining pattern of vascular specificity in the field of vascular function in the same apparatus. In the blood vessels, the sugar points, the blood vessels, the blood vessels, the blood vessels The blood vessels were characterized by molecular staining, Eogt staining, and so on. The theory of blood vessels is much higher than that of other blood vessels, which is different from that of Eogt. The vascular endothelial cells were cultured with special external stimuli, the endothelium cells were incubated with the vascular endothelial cells, the brainstorming was given, the Eogt cells were added, the external stimuli were added, and the external stimuli were detected by the Eogt. The red light, the red light, the red, the red, At present, it is possible to get rid of the blood vessels, the Eogt, the disease, the symptoms, and the mating process.