权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Research on the mechanism of reproductive communication between males and females via peptide sex pheromones

肽性信息素雌雄生殖通讯机制研究

基本信息

批准号：
22K06305
负责人：
中田友明
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Nippon Veterinary and Life Science University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究では、異性の性行動を単一分子で誘起し得る雄性フェロモン（ソデフリン）と雌性フェロモン（アイモリン）が共に同定された四肢動物であるアカハライモリをモデルに、雌雄両性の性フェロモン応答処理中枢神経系と、その内分泌学的調節機序の詳細を解析することを目的としている。初年度にあたる本年は以下の5つの実験を行い、それぞれに一定の成果を得た。1. 雄性フェロモンソデフリンのノックアウト(KO)動物の作成：ソデフリンペプチドのコード領域上流にあるPAM配列を認識して当該ゲノムDNA配列に得意的な切断をするガイドRNAとCas9酵素をイモリ受精卵に顕微注入することで、ソデフリン遺伝子にNHEJ（非相同末端結合）の修復ミスに起因するフレームシフトを誘発させ、性フェロモンKO動物(F0)を作成した。今後、交配によって非モザイク性のF1動物を得て、解析を行う予定である。2. 今後の解析に必要なアルビノ個体の準備：ゲノム編集により作成したメラニンを持たないアルビノイモリのF0個体を得て、今後の蛍光シグナルでの解析を容易なものとした。3. イモリのcrystallinプロモーターのクローニング：水晶体で同プロモーター下流の蛍光タンパク質を発現させ、外来遺伝子導入マーカーとして発生初期に遺伝子導入を確認可能となる。4.複数のソデフリンパラログ・神経活動依存的に発現する最初期遺伝子（Egr-1およびArc）プロモーターのクローニング：それぞれ、性フェロモンの発現調節機構の解析や、フェロモン受容応答神経系の同定や解析に利用できる。5. 脳内の神経回路解析に有用な神経細胞標識を達成するBrainBowコンストラクトの作成：複数の蛍光タンパク質の発現を神経細胞ごとにランダムに起こすことで、個々の神経繊維の追跡が可能となるため、今後、同コンストラクトを導入したイモリが応答神経系の同定や解析に利用できる。

The purpose of this study is to provide a detailed analysis of the endocrine regulatory mechanisms of the central nervous system in both sexes, both sexes, and quadruped animals, both of which are induced by a single molecule. In the beginning of the year, the following five years were carried out, and certain achievements were achieved. 1. The male female (KO) animal is made up of: PAM alignment is recognized in the upstream of the DNA sequence in the genome, and when the DNA sequence is successfully cut off, RNA Cas9 enzyme is used to microinject the fertilized egg, and the DNA sequence in the NHEJ (non-identical terminal binding) is induced to induce the development of DNA, and the DNA sequence in the KO animal (F0) is produced. In the future, mating is not the same as sex. F1 animals are analyzed. 2. Preparation of the individual necessary for future analysis: compilation, creation, maintenance, and analysis of the individual in the future 3. The crystal structure of the crystal structure: crystal structure of the crystal structure. 4. The analysis and utilization of the initial phase of the evolution of complex software, which is dependent on the occurrence of neural activity, and the evolution of the regulatory mechanism for the occurrence of complex software, which is dependent on the occurrence of neural activity, are discussed. 5. BrainBow system identification is used to create a neural circuit analysis in the brain: multiple light sources are generated in the neural cell identification process, and a single neural circuit trace is possible in the future, and the same system identification process is introduced into the brain.