脊椎動物はいつキチンを失い、粘液層定着型の腸内細菌との共生関係を成立させたか?
脊椎动物何时失去几丁质并与粘液定植的肠道细菌建立共生关系?
基本信息
- 批准号:22K06346
- 负责人:
- 金额:$ 2.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2027-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は、脊椎動物の消化管表面の構造・成分・細菌叢の比較を通じて、キチンバリア免疫機構が脊椎動物のどの進化段階で喪失したかを明らかにし、派生的な「粘液層定着型の腸内細菌との共生関係」が成立した過程を再検討する。本年は、脊椎動物に最も近縁な無脊椎動物であるホヤの仲間カタユウレイボヤ(Ciona intestinalis type A)を用いて、そのキチンバリア内外の細菌叢の解析を行った。脊椎動物から得られたデータを解釈するための基準として機能する外群としての位置づけである。スワブを用いた菌体の採取法の再検討を行い、より微細な検体からも安定的に菌叢を採取できるようになった。採取した菌叢からの核酸抽出には、通常の試薬に比べて細菌の混入が少ないことが保証されている試薬を導入したことにより、安定的に結果が得られるようになっている。PCR法による増幅・次世代シーケンサーを用いた塩基配列情報の取得は、タグ配列を活用することで一回のシーケンスランあたりの検体処理数を増やせた結果、効率よくデータが出せるようになった。バイオインフォの手法による塩基配列情報の解析は、日進月歩の分野であり、新しい解析手法やソフトウェアを活用することにより、より信頼性の高い結果が得られている。このように、概ね当初の計画通り、作業を推し進めることができた。今後、マンパワーの不足・解析時間の縮小が予想されるため、より一層の効率化を図ることが大切であると考えている。
This study is based on a comparison of the structure, composition, and bacterial flora on the surface of the digestive tract of vertebrates, and a review of the process of establishing the "symbiotic relationship between mucus-layer-anchored intestinal bacteria" derived from the loss of the immune mechanism in the evolutionary stage of vertebrates. This year, the most common invertebrate species in the world are Ciona intestinalis type A. Vertebrate animals are not allowed to use their position as a benchmark. The method of collecting bacteria and bacteria is used to re-examine the process of collecting bacteria and bacteria. The nucleic acid extracted from the flora is usually tested to reduce the amount of bacteria mixed in, and to ensure that the results of the test are stable. The number of samples processed by PCR is increased. The analysis of the basic arrangement information in the method of "white paper", the division of daily progress and monthly progress, the new analysis method, the application of "white paper" and the high reliability of the result are obtained. This is the first time I've been working on this project. In the future, the analysis time is reduced, and the efficiency of one layer is reduced.
项目成果
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