Mechanisms of aggregation and fibril formation of amyloidogenic proteins with amyloid cofactors

淀粉样蛋白与淀粉样辅因子的聚集和原纤维形成机制

• 批准号: 22K06556
• 负责人: 斎藤 博幸
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06556/
• 关键词: 薬学; 生物物理化学; タンパク質; 抗体; アミロイドーシス; アミロイド; 蛋白質

本研究課題では、全身性アミロイドーシスの前駆タンパク質としてアポA-Iや血清アミロイドA、さらには神経変性疾患タンパク質としてパーキンソン病αシヌクレインなどをターゲットとし、これら前駆タンパク質の生体夾雑環境における凝集・線維化、細胞間伝播が、細胞膜脂質や硫酸化糖鎖、アミロイド共存タンパク質であるアポA-IVやアポEなどの生体分子群との相互作用ネットワークによって制御されている分子メカニズムを解明する。さらに、アミロイド前駆タンパク質や共存分子を標的とした新規特異抗体の開発を行い、アミロイド線維高感度検出系の構築やin vivoイメージング法の検討を進める。令和４年度は、核形成-自己触媒線維伸長モデルに基づくFinke-Watzky速度式による解析ならびに核形成・線維伸長速度定数の温度変動解析から、αシヌクレインのA30PやA53Tなどの家族性パーキンソン病変異体やレビー小体病にみられるC末欠損体（Δ104-140やΔ123-140）の凝集・線維化反応の熱力学的特性の解明を行った。その結果、αシヌクレインのA53T変異と104-140残基欠損では線維化促進のメカニズムが異なることが示唆され、A53T変異はモノマーから凝集核の形成をエンタルピー的に促進して線維化の開始を早める一方、104-140残基領域の欠損はモノマーと線維の相互作用を変化させて線維化を自己触媒的に加速することが明らかとなった。以上の結果は、家族性変異やC末欠損によるパーキンソン病発症機序解明に向けた物理化学的基盤情報を与える。また、アミロイド共存分子としてアポA-Iと同様にアミロイド凝集傾向の高いN末領域を有するアポA-IVに関し、大腸菌大量発現・精製系の構築を行い、特に組織沈着が報告されているアポA-IV のN末70残基フラグメントについて、そのアミロイド凝集性を確認した。

This research topic で は, systemic ア ミ ロ イ ド ー シ ス の before 駆 タ ン パ ク qualitative と し て ア ポ A -i や serum ア ミ ロ イ ド A, さ ら に は 経 god - disorder タ ン パ ク qualitative と し て パ ー キ ン ソ ン disease alpha シ ヌ ク レ イ ン な ど を タ ー ゲ ッ ト と し, こ れ ら before 駆 タ ン パ ク qualitative の raw body clip 雑 environment に お け る agglutinate line dimensions, 伝 between cells Sowing が, membrane lipid や sulfating sugar lock, ア ミ ロ イ ド coexistence タ ン パ ク qualitative で あ る ア ポ A - IV や ア ポ E な ど の raw body molecular group of と の interaction ネ ッ ト ワ ー ク に よ っ て suppression さ れ て い る molecular メ カ ニ ズ ム を interpret す る. Before さ ら に, ア ミ ロ イ ド 駆 タ ン パ ク mass や coexistence molecular を mark と し た の open new rules specific antibody 発 を い, ア ミ ロ イ ド line d Gao Gan degree 検 out is の build や in vivo イ メ ー ジ ン グ method の beg を 検 into め る. Make annual は, nucleation and 4 - their catalytic line d elongation モ デ ル に base づ く Finke - Watzky speed type に よ る parsing な ら び に nucleation, line d elongation rate constant temperature variations の dynamic analytic か ら, alpha シ ヌ ク レ イ ン の A30P recommended on や A53T な ど の familial パ ー キ ン ソ ン disease - with や レ ビ ー corpuscle disease に み ら れ る owe at the end of the C The properties of thermodynamics of the damaged body (Δ104-140やΔ123-140) <s:1> coagulation and linearization are 応 and explained in を rows った. そ の results, alpha シ ヌ ク レ イ ン の A53T - different と residue owe 104-140 loss で は line dimensions promote の メ カ ニ ズ ム が different な る こ と が in stopping さ れ, A53T - different は モ ノ マ ー か ら agglutination nuclear の form を エ ン タ ル ピ ー に promote し て line dimensions の began early を め る side の owe residue field, 104-140 loss は モ ノ マ ー D の interaction を と line - the さ せ て line d processs を catalytic に accelerate their す る こ と が Ming ら か と な っ た. の above results は, familial - different や owe loss at the end of the C に よ る パ ー キ ン ソ ン disease 発 disease machine sequence interpret に to け た intelligence を base plate of physical chemistry and え る. ま た, ア ミ ロ イ ド coexistence molecular と し て ア ポ with others in A - I と に ア ミ ロ イ ド high agglutination tendency の を い N at the end of the field have す る ア ポ A - IV に masato, coliform し 発 now, refined line is の build を い, shen the が に report さ れ て い る ア ポ A - IV の N at the end of the 70 residues フ ラ グ メ ン ト に つ い て, そ の ア ミ ロ イ ド agglutinative を confirm し た.

项目成果

両親媒性アルギニンペプチドの脂質膜相互作用および細胞膜透過に及ぼす疎水性モーメントの影響

疏水矩对两亲性精氨酸肽脂膜相互作用和细胞膜渗透的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 原矢佑樹;扇田隆司;小谷真菜;河野弘樹;斉藤千尋;朝比奈裕子;西辻和親;内村健治;佐藤毅;川野竜司;加藤くみ子;伊豆津健一;斎藤博幸
• 通讯作者: 斎藤博幸

Analysis of the interaction of cyclosporine congeners with cell membrane models

环孢素同系物与细胞膜模型相互作用的分析

• DOI: 10.1016/j.jpba.2022.114874
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis
• 影响因子: 3.4
• 作者: Nakao Mizuka;Takechi-Haraya Yuki;Ohgita Takashi;Saito Hiroyuki;Demizu Yosuke;Izutsu Ken-Ichi;Sakai-Kato Kumiko
• 通讯作者: Sakai-Kato Kumiko

αシヌクレインの線維化及び細胞毒性に対する高凝集性領域の寄与

高聚集区域对 α-突触核蛋白纤维颤动和细胞毒性的贡献

• 发表时间: 2022
• 作者: 河野弘樹;鎌田真央;南波憲宏;扇田隆司;森田いずみ;大山浩之;長尾耕治郎;小林典裕;斎藤博幸
• 通讯作者: 斎藤博幸

新規抗アポEモノクローナル抗体のアポEアイソフォーム反応特性の物理化学的評価

新型抗 apoE 单克隆抗体的 apoE 异构体反应特性的理化评价

• 发表时间: 2023
• 作者: 坂井瑚都;福井和華;南波憲宏;扇田隆司;木口裕貴;森田いずみ;大山浩之;長尾耕治郎;小林典裕;斎藤博幸
• 通讯作者: 斎藤博幸

ApoA-Iの構造安定性とアミロイド線維形成性に及ぼすアミロイドーシス変異の影響

淀粉样变性突变对 ApoA-I 结构稳定性和淀粉样原纤维形成特性的影响

• 发表时间: 2023
• 作者: 南波憲宏;上野美羽;朝比奈裕子;扇田隆司;島内寿徳;佐藤毅;斎藤博幸
• 通讯作者: 斎藤博幸