Antioxidant activity of nitrite and its physiological significance.

亚硝酸盐的抗氧化活性及其生理意义。

• 批准号: 22K06645
• 负责人: 土屋 浩一郎
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06645/
• 关键词: 亜硝酸塩; 活性酸素; 酸化ストレス; 亜硝酸; 活性酸素種

これまで予備実験として、亜硝酸塩を生体内で生成する酸化力の高い物質であるヒドロキシラジカルと接触させると、ヒドロキシラジカルを濃度依存的に消去することを見いだしていた。そこで、2022年度は、培養細胞を用い、この反応によるヒドロキシルラジカルからの亜硝酸塩による死亡保護作用をより詳細に検討することとした。マウスマクロファージ由来RAW264.7細胞を用い、培地を過酸化水素を加えたPBSに交換し、さらに365nmの紫外線を照射することでヒドロキシルラジカルを発生させた条件下で細胞生存率をMTTアッセイで検討したところ、亜硝酸塩による細胞保護作用が見られなかった。しかし実験に用いたPBSをキレート剤を用いて遷移金属を十分に除去した上で同様の検討を行ったところ、300μM過酸化水素単独では細胞障害は起きず、UV照射により障害が惹起され、これは亜硝酸塩の共存でコントロールレベルまで回復することを確認した。この結果より、これまでの実験で結果が一定しなかったのは、培養細胞実験に用いた培地に含まれる遷移金属が、過酸化水素由来の活性酸素種生成に影響を与えていたことが示唆された。実験系が確立したことで、次の検討項目として、ヒドロキシルラジカルにより、RAW264.7細胞で起きている細胞傷害について、細胞老化のマーカーであるp-γ-H2AXとp21の発現について検討したところ、ともに時間依存的な発現の増加が見いだされた。現在、これら老化マーカーに対する亜硝酸塩の効果を検討している。

Therefore, it is possible to see that nitric acid, a high-acid substance that generates acidification power in the body, can be eliminated in a concentration-dependent manner when exposed to it. In 2022, the protective effect of nitric acid on cultured cells was discussed in detail. RAW264.7 cells were cultured and acidified with PBS, and irradiated with ultraviolet rays at 365nm. The cell survival rate was evaluated by MTT and nitric acid. In addition, it was confirmed that the cell damage caused by PBS, 300 μ M peracidified water alone, and UV irradiation caused by PBS, 300μM peracidified water alone, and 300μM peracidified water alone caused by PBS, 300μM peracidified water alone caused by PBS, and 300μM peracidified water alone caused by UV irradiation caused by PBS, 300 μ M peracidified water alone caused by UV irradiation caused by PBS, and 300 μ M peracidified water alone caused by UV irradiation. The results of this study are as follows: 1. The effects of migration of metals and peracidified water on the production of active acid species in cultured cells are studied. The results indicate that the development of cell injury in RAW264.7 cells, the development of p-γ-H2AX and p21 in cell aging, and the increase of time-dependent development of RAW264.7 cells have been established. Now, this is the first time that I've seen you.